可溶性蛋白的作用
镉对可溶性蛋白含量的影响
重金属离子进入植物体后,与其他化合物结合成金属络合物或螯合物,抑制植物各种代谢活动尤其是蛋白质的合成。因此,可溶性蛋白质含量是衡量植物是否发生重金属胁迫的重要指标。
高浓度的镉离子溶液可导致量下降,主要有两方面原因,一是镉进入细胞后促进了蛋白水解酶的活性,加强了原有蛋白质分解;二是镉对蛋白合成的众多酶系均有毒害和纯化钉用,并且会使蛋白质合成的相关细胞器受到损伤,抑制了新蛋白的合成。而低浓度的镉离子溶液则会导致可溶性蛋白含量增加,而可溶蛋白质含量的提高,很可能是植物抵抗镉毒害的一种解毒机制,例如镉能诱导产生镉结合蛋白,而降低镉的毒性。可溶蛋白质含量的提高,还会增加细胞渗透浓度和功能蛋白的数量,有助于维持细胞正常代谢,但高浓度镉对蛋白质的台成起破坏作用。
测定植物体内可溶性蛋白有什么意义和用途?
植物体内的可溶性蛋白质大梗数是参与各种代谢的酶类,可溶性蛋白质含量是一个重要的生理生化指标,测其含量是了解植物体总代谢的一个重要指标;在研究每一种酶的作用时,常以比活(酶活力单位/mg蛋白)表示酶活力大小及酶制剂纯度,这就需要测定蛋白质含量。因此,测定植物体内可溶性蛋白质是研究酶活的一个重要项目。
什么是可溶性蛋白质
可溶性蛋白指可以以小分子状态溶于水或其他溶剂的蛋白;
为什么要测定可溶性蛋白质?在做植物胁迫论文时 问什么要测定可溶性蛋白质?有什么意义?
1.蛋白质和糖不仅是植物重要的组织部分,同时也是营养物质。2.蛋白质是细胞中最重要的含氮的大分子之一,蛋白质的含量和种类也是衡量农产品品质的指标,其中蛋白质也是三大营养物质之一.3.植物体内的可溶性蛋白质不公是参与各种代谢的酶类,测其含量是可以了解植物体总代谢的一个重要指标。4.可溶性蛋白含量是其抗逆性的体现。
测定植物体内可溶性蛋白质含量有什么意义和用途?
蛋白质是生物体内占干重比例最大的分子,是生命活动的体现者,一般做酶活实验都是以每Mg蛋白质标定,即U/Mg蛋白质
测定植物体内可溶性蛋白含量有什么意义和用途
测定植物体内可溶性蛋白含量的意义和用途:
测定可溶性蛋白质含量也可以衡量植物在某种条件下是否会发生重金属胁迫。
蛋白质是生物体内占干重比例最大的分子,是生命活动的体现者,一般做酶活实验都是以每Mg蛋白质标定,即U/Mg蛋白质。
植物体内的可溶性蛋白质大多数是参与各种代谢的酶类,可溶性蛋白质含量是一个重要的生理生化指标,测其含量是了解植物体总代谢的一个重要指标。
植物体内可溶性蛋白含量的测定:
一、标准曲线的绘制
(1)取7支试管,编号后,分别加入0ml、0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml标准蛋白质溶液,用蒸馏水补足1ml,使每管含蛋白量分别为0μg、25μg、50μg、100μg、150μg、200μg、250μg(必要时可做重复)。
(2)在每支试管中用定量加样器加入5ml甲液,混匀,于30℃下放置10min。
(3)在每支试管中喷射加入0.5ml乙液,立即振荡混匀,在30℃下保温30min。
(4)准确到30min后,以不加标准蛋白试管中的溶液为空白,在500nM下用1cm光径的比色杯对系列标准蛋白溶液进行比色,测定光密度值。
以蛋白浓度为横坐标,光密度值为纵坐标,绘制标准曲线。
二、样品的测定
(1)样品的提取:称取鲜样0.5g,用5ml蒸馏水或缓冲液研磨提取。
取1.0ml(视蛋白质含量适当稀释)样液加入试管中,然后重复步骤2的(2)、(3)、(4),以标准曲线中的0管为空白,测定吸光值。
(2)根据吸光值查标准曲线,求出比色液中的蛋白质含量。
三、结果计算
样品中蛋白的含量(mg/g)=C×VTV1×FW×1000
式中C:查标准曲线值(μg);VT:提取液总体积(ml);FW:样品鲜重(g);V1:测定时加样量(ml)。
四、注意
还原物质,其他酚类物质及柠檬酸对此反应有干扰。
测定植物体可溶性蛋白质含量有什么意义和用途?试举二例说明
pro是组成人体的重要成分之一,人体的一切细胞都由pro组成
2 .pro维持体内酸碱平衡
3 .pro 是食品的重要组织部分之一,也是重要的营养物质
4 .pro 是评价食品质量高低的指标,还关系到人体健康.
蛋白质在食品中有哪些功能性质
1.乳化性质
许多食品属于乳胶体(冰淇淋、豆奶),蛋白质成分在稳定这些胶态体系中通常起着重要的作用。天然乳胶体靠脂肪球“这种“膜”由三酰甘油、磷脂、不溶性脂蛋白和可溶性蛋白的连续吸附层所构成。蛋白质一般对水/油(W/O)型乳胶液的稳定性较差。这可能是因为大多数蛋白质的强亲水性使大量被吸附的蛋白质分子位于界面的水相一侧。蛋白质的表面活性不仅与蛋白质中氨基酸的组成、结构、立体构象、分子中极性和非极性残基的分布与比例,二硫键的数目与交联,以及分子的大小、形状和柔顺性等内在因素有关,而且与外界因素,甚至加工操作有关。凡是能影响蛋白质构象和亲水性与疏水性的环境因素,诸如pH、温度、离子强度和盐的种类、界面的组成、蛋白质浓度、糖类和低分子量表面活性剂,能量的输入,甚至形成界面加工的容器和操作顺序等,都将影响蛋白质的表面活性。
2.起泡性
食品泡沫通常是气泡在连续的液相或含可溶性表面活性剂的半固相中形成的分散体系。种类繁多的泡沫其质地大小不同,例如蛋白质酥皮、蛋糕、棉花糖和某些其他糖果产品、点心顶端配料、冰淇淋、蛋奶酥、啤酒泡沫、奶油冻和面包等。大多数情况下,气体是空气或CO2,连续相是含蛋白质的水溶液或悬浊液。某些食品泡沫是很复杂的胶态体系,例如冰淇淋中存在分散的和群集的脂肪球(多数是固体)、乳胶体(或悬浊液)、分散的冰晶悬浮体,多糖凝胶、糖和蛋白质的浓缩溶液以及空气气泡。各种泡沫的气泡大小不相同,直径从1微米到几cm不等,气泡的大小取决于多种因素,例如,液相的表面张力和粘度、输入的能量,分布均匀的细微气泡可以使食品产生稠性、细腻和松软性,提高分散性和风味感。
3.凝胶性
变性的蛋白质分子聚集并形成有序的蛋白质网络结构过程称为胶凝作用。胶凝是蛋白 质的重要功能性质,在许多食品的制备中起着主要作用,包括各种乳品、果冻、凝结蛋白、明胶凝胶、各种加热的碎肉或鱼制品、大豆蛋白质凝胶、膨化或喷丝的组织化植物蛋白和面包面团的制作等,中国人喜爱的豆腐食品,就是大豆蛋白胶凝作用的产物。蛋白质胶凝作用不仅可用来形成固态粘弹性凝胶,而且还能增稠,提高吸水性和颗粒粘结、乳状液或泡沫的稳定性。
4.溶解度
大豆蛋白质在溶解状态下才能发挥其在食品体系中的功能特性。大豆蛋白质的溶解度是指大豆蛋白质以胶体的形式分散到水中的能力。蛋白质分子的极性表面和所带的净电荷有助于分散体系的稳定。大豆蛋白质的溶解度可以用可溶性氮指数(NSI)和蛋白质分散度指数(PDI)两种方法表示。影响大豆蛋白质溶解度的因素主要包括温度、pH和无机盐。
蛋白质的水溶性是指它的溶解度吗?它有什么特殊的作用吗?
是的,蛋白质的水溶性直接影响到的它的利用,很多功能性蛋白质由于水溶性差,很难应用到食品中,水溶性差又会影响到它的乳化性,分散性,而这又是蛋白质重要的功能性质,一些肉制品和饮料的加工与这些性质有很大关系。
关于可溶性蛋白质的提取和鉴定 5分
按照蛋白的提取方式提取就行了。一般有些步骤都是不变的,破碎--离心--提取
提取的话看你要提取的蛋白的性质进行选择。有电泳,盐析,HPLC。
提取后纯化该蛋白,可以采用凝胶柱进行分离,然后进行SDS-page,确定分子量大小,还可以进行蛋白测序。然后可以通过X光衍射确定蛋白结构。具体蛋白质生物功能测定法举例:
1淀粉酶目的基因的鉴定:
淀粉酶能将淀粉水解为多糖或单糖。将难溶淀粉酶能将淀粉水解为多糖或单糖。将难溶于水
的淀粉加入固体培养基内,培养基呈混浊状。将待鉴定的重组克隆涂布在此培养基上,含目的基因的目的重组子可其表达的淀粉酶分泌出胞外,并均匀扩散,同时降解淀粉为可溶性
的多糖或单糖。因此,目的重组子菌落周围会形成透明圈。如果透明圈不明显,还可往培养板上喷碘,使淀粉所在区域呈蓝色本底,易于辨认。
2蛋白酶、脂肪酶等目的基因也可采用类似的方法进行鉴定
3抗菌素抗性基因的鉴定:
抗菌素抗性基因表达的蛋白质能使受体细胞产生对该抗生素的抗性。据此,只需往培养板中加入适量抗生素,理论上长出的菌落即是含有目的基因的目的重组子
在实际操作过程中,由于抗生素有时会诱导受体细胞产生抗性,因此必须从抗性重组克隆中抽出重组质粒,二次转化受体细胞。如果此时转化平板上出现大量的抗性菌落,即可认为这种抗性确由目的基因的编码产物产生
4DNA结合蛋白编码基因的鉴定:
用氯仿蒸汽或烈性噬菌体喷洒克隆平板
用聚乙烯薄膜影印裂解平板
轻轻漂洗影印薄膜,干燥固定
80℃烘干固定影印薄膜
与探针溶液中杂交
洗涤、干燥、感光
探针选用能与目标蛋白特异 性结合的DNA片段
杂交释放转译鉴定:无细胞体外翻译系统:麦胚提取物、网织红细胞提取物
5蛋白质生物结构鉴定法
放射免疫原位杂交鉴定:
用氯仿蒸汽或烈性噬菌体喷洒克隆平板用固定了特异性抗体的聚乙烯薄膜影印
裂解平板
轻轻漂洗影印薄膜,干燥固定
与I125标记的IgG保温洗涤、干燥、感光
6免疫沉淀鉴定:
在琼脂培养基中加入目标蛋白的特异性抗体
然后涂布转化液
经培养后,目的重组子菌落变会分泌出目标
蛋白,后者与特异性抗体发生免疫沉淀
反应,在菌落周围形成白色的圆斑
此法简便快速,但灵敏度低,抗体消耗量大
7外源基因产物检测
聚丙烯酰胺凝胶电泳法
如果待筛选鉴定的目标蛋白既不能测定生物活性,又无现成的抗体使用,则可采用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行粗略的筛选