冰冻切片步骤

冰冻切片的冰冻切片的制作方法

低温恒冷箱冷冻切片制作法以Shandon As 620 E型恒温箱冷冻切片机为例，该机的箱面上有电子控制板，装有即时冷冻键和除霜键，启动即时冷冻键，机器马上进行工作状态，并可持续10mins。启动即时除霜键，可将工作间顶部后面的制冷栅上的霜除掉，并可持续15mins。有照明键一个，启动该键可照明工作间，有利工作及观察组织的冰冻状况。配有消毒键一个，当进行一周的工作或者一天的工作后，启动该键，可对工作间进行消毒。当每天工作完毕时，可启动密锁键，锁住工作间。除此之外，箱面的左边有四个按键，两个为快速自动进退键，两个为微小进退键，还有一个手动旋钮，调节修组织块时的进退。冷冻箱内左边的冷冻台，温度可达-60℃左右，冷冻箱的中间为一台切片机，工作间的温度在0-30℃间可任意调节，并在箱面上的荧屏显示出来。 ①取材，未能固定的组织取材，不能太大太厚，厚者冰冻费时，大者难以切完整，最好为24×24×2mm。②取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上，冰冻。小组织的应先取一支承器，滴上包埋剂让其冷冻，形成一个小台后，再放上细小组织，滴上包埋剂。③将冷冻好的组织块，夹紧于切片机持承器上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。④调好欲切的厚度，根据不同的组织而定，原则上是细胞密集的薄切，纤维多细胞稀的可稍为厚切，一般在5～10um间。⑤调好防卷板。制作冰冻切片，关键在于防卷板的调节上，这就要求操作者要细心，准确地将其调较好，调校至适当的位置。切片时，切出的切片能在第一时间顺利地通过刀防卷板间的通道，平整地躺在持刀器的铁板上。这时便可掀起防卷板，取一载玻片，将其附贴上即可。⑥应视不同的组织选择不同的冷冻度。冷冻箱中冷冻度的高低，主要根据不同的组织而定，不能一概而论。如：切未经固定的脑组织，肝组织和淋巴结时，冷冻箱中的温度不能调太低，在-10- -15℃左右，切甲状腺、脾、肾、肌肉等组织时，可调在-15～20℃左右，切带脂肪的组织时，应调至-25℃左右，切含大量的脂肪时，应调至-30℃。 ①防卷板及切片刀和持刀架上的板块应保持干净，需经常用毛笔挑除切片残余和用柔软的纸张擦。有时需要每切完一张切片后就用纸擦一次。因为这个地方是切片通过和附贴的地方，如果有残余的包埋剂粘于刀或板上，将会破坏甚至撕裂切片，便切片不能完整切出。②多例多块组织同时需做冰冻切片时，可各自放于不同的支承器上，于冷冻台上冻起来，然后依据不同的编号，依序切片，这样做既不费时也不会乱。③放置组织冰冻前，应视组织的形状及走势来放置，所谓“砍柴看柴势”，切片也是如此，如果胡乱放置，就不能收到很好的效果。④组织块不须经各种固定液固定，尤其是含水的固定液，在未达到固定前，更不能使用。临床快速冰冻切片，不须要预先固定，一是为了争取时间，二是固定了的组织，反而增加了切片的难度。如果使用未完全固定的组织做冰冻切片，就会出现冰晶。这是因为含水的固定液在组织未经固定前，其中的水份也可渗入到组织中去，当冰冻发生时，这些水份就存留于组织中，形成了冰晶。⑤当切片时，如果发现冰冻过度时，可将冰冻的组织连同支承器取出来，在室温停留片刻，再行切片，或者用口中哈气，或者用大拇指按压组织块，以此来软化组织，再行切片。另者，调高冰冻点。⑥用于附贴切片的载玻片，不能存放于冷冻处，于室温存放即可。因为当附贴切片时，从室温中取出的载玻片与冷冻箱中的切片有一种温度差，当温度较高的载玻片附贴上温度较低的切片时，由于两种物质间温度的差别，当它们碰撞在一起时，分子彼此间发生转移而产生了一种吸附力，使切片与载玻片牢固地附......余下全文>>

冰冻切片机的冰冻切片的方法

标本的处理：乳腺、子宫等大块组织经取材,组织周边加包埋剂置于组织样品冷冻头,当表面出现白色时表示组织已冻结即可切片。对小组织如肾穿刺的小组织,先取冷冻头 (样品头)加少许包埋剂置于速冻,用速冻器稍压平,当出现硬结时即平放小组织,再次置于冷冻组织,这样将小组织垫高,就能快速切出高质量的切片。染色方法为HE染色法,步骤为: 切片用10%甲醛液固定30s 75% 酒精30s 水 洗 苏 木 素 溶 液 染 细 胞 核 2 —3 min 水 洗 1% 盐 酸 酒 精 分 化 水洗 1%氨水液反蓝 水洗 伊红染细胞浆30s或1min 水洗 依次梯度酒精脱水 二甲苯透明一树胶封固。

大鼠脑做冰冻切片步骤

做冰冻切片的话，不能用甲醛固定的，最好用新鲜标本做。你现在不如做石蜡包埋切片更好，石蜡切片的清晰度更浮的。保存时间也常。

乳房良性需要切出，做冰冻切片，石腊切片是怎样过程

武汉市三医院病理科王晖张女士近日在洗澡时摸到自己右侧乳腺长了一个不痛、不痒、不红、不肿红枣样大小的硬块，十分紧张，立即到医院看医生。医生做了一番检查后，建议她住院手术。忐忑不安的她拿着住院通知单住进了外科，管床医生又给她开了许...3719

冰冻切片该如何运输？

干冰。冰冻切片码齐装在塑料切片盒中，整个盒子深埋在干冰粒中。盒子与干冰粒装在泡沫塑料盒中帮助保温。泡沫塑料盒外面可以再用纸板箱比较容易封口和包装。如果没有纸板箱，要仔细的用胶带和绳子捆扎。特别注意干冰不能够密封牢，因为干冰汽化会造成气压升高，密封的话有爆炸危险。

干冰的用量与盒子的大小和运输时间有关系。你可以让售卖干冰的公司给你建议。他们不需要知道样品的性质，原则只是保证运到的时候干冰没有化完就可以了。

冰冻切片，he是最常见的制片和染色方法吗

冰冻切片，HE的确是最常见的制片和染色方法

冰冻切片HE苏木素伊红染色步骤

切片固定30秒到1分钟。

水洗。

染苏木素3到5分钟。成熟苏木素制作，加入碘酸钠0.2g碘酸钠每1L苏木素。

分化。

于碱水中返蓝20秒。

伊红染色10到20秒。

脱水，透明，中性树胶封固。

冰冻切片组织脱水蔗糖溶液怎么配

全部实验步骤 1 取新鲜组织于4%多聚甲醛固定24小时 2 30%蔗糖脱水48小时以上 3 -250C包埋（冰冻切片机内） 4 冰冻切片 冰冻切片步骤 冰冻切片免疫组化染色步骤： 冰冻切片4~8μm，室温放置30分钟后，入4℃丙酮固定10分钟，PBS洗，5分钟×3次。用3%过氧化氢孵育5~10分钟，以消除内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗，5分钟×2次。下接石蜡切片免疫组化染色操作步骤。(见我发的前面的帖子) 你确定你是冰冻切片吗？？？ 冰冻切片不能用热修复啊！！！ 以下是我的步骤： 1 冰冻切片室温放置30分钟后，入4℃丙酮固定10分钟，PBS洗，5分钟×3。用3％过氧化氢孵育5~10分钟，PBS洗，5分钟×2。 2 5~10％正常山羊血清（PBS稀释）封闭，室温孵育10分钟。倾去血清，勿洗，滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液，37℃孵育1~2小时或4℃过夜。 3 PBS冲洗，5分钟×3次。 4 滴加滴加第二代生物素标记二抗工作液，37℃或室温孵育30分钟。 PBS冲洗，5分钟×3次。 5 滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液，37℃或室温孵育10~30分钟。 6 PBS冲洗，5分钟×3次。 7 显色剂显色（DAB）。 8 自来水充分冲洗，复染，封片。

制作冰冻切片过程中OCT包埋剂怎么使用，怎么将组织至于切片机上？

将组织置于冷冻托上将otc挤出覆盖在组织上，放置快速冷冻架上1分钟即耿，把冷冻托放在标本夹头上切就可以了