柱层析分离

柱层析法的原理？

柱层析原理:

柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附。当采用溶剂洗脱时，发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程，吸附力较强的组分，移动的距离小，后出柱；吸附力较弱的组分，移动的距离大，先出柱。

硅胶柱层析流动相：

极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统；极性较大的用甲醇：氯仿系统；极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统；拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸

一般都是利用极性相似相容原理，看流动相与固定相的极性，大部分是固定相的极性小于流动相，然后流动相的极性与所要洗脱的物质极性比较接近，从而鼎物质洗脱下来。

层析柱的中压分离层析柱操作方法

以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例 以一定比例的石油醚一丙酮为洗脱液，60ML/MIN的流速进行梯度洗脱，柱的使用压力为2～ 3KG/C 。按每份500ML收集，TLC检识展开剂丙酮一氯仿(2：8)，显色剂5%香草醛浓硫酸乙醇液至洗脱完全，相同流份合并，回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加人适量甲醇热溶后自然放置，析出结晶，为冬凌草甲素。 取适量冬凌草甲素对照品及由上述方法得到的冬凌草甲素样品甲醇溶解后点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿一丙酮(8：2)为展开剂进行展开，5% 香草醛浓硫酸乙醇液显色，于105。C烘至斑点清晰。表明在该展开系统下，冬凌草甲素样品和对照品都具有相同的RF值，并呈现出同样的蓝绿色斑点，在制备的冬凌草甲素样品中，没有杂质斑痕。 注册号 国食药监械(进)字2009第1400388号 生产厂商名称（中文） 　产品性能结构及组成 产品主要组成：层析柱由层析柱体、填充剂和密封栓组成。柱体为不锈钢材质；填充剂为异丁烯酸酯合成物形成的亲水聚合物约0.6mL；密封栓由聚醚醚酮树脂(PEEK)组成。 产品适用范围 该产品用于对血液中不同的糖化血红蛋白进行分离。 注册代理 希米科医药技术发展(北京)有限公司 售后服务机构 爱科来国际贸易(上海)有限公司 批准日期 2009.02.26 有效期截止日 2013.02.25 生产厂商名称（英文） ARKRAY Factory, Inc. 生产厂地址（中文） 1480 Koji, Konan-cho, Koka, Shiga, JAPAN 生产场所 1480 Koji, Konan-cho, Koka, Shiga, JAPAN 生产国（中文） 日本 产品名称（中文） 层析柱 产品名称（英文） COLUMN UNIT 规格型号 HS-VII 产品标准 进口产品注册标准YZB/JAP 0057-2009《层析柱》

层析柱中若留有空气或装填不匀,会怎样影响分离效果?应怎样避免呢？

影响层析柱整体渗透速度分布不均，致使色素带不是整齐的环状色素带，进而增长分离各色素的时间！应在装填层析柱前用适量的丙酮润洗一下，后在装入氧化铝时互边加边敲打层析柱使氧化铝殷实，然后用真空抽滤方法，用乙醚进行抽滤至无气泡为止！

实验室用柱层析分离的物质工业上怎么分离

试题答案：因泥沙不溶于水，所以我们可用过滤的方法，将泥沙除去．而要想将食盐溶液中的溶质食盐得到，只能用蒸发溶剂的方法得到食盐．酒精和水的沸点不同，酒精的沸点低，所以可用蒸馏的方法得到酒精．在实验室中可用蒸馏的方法得到纯净水．水在炙业上的用途就是灌溉农作物，在工业中可用水做锅炉用水．在生活中水是生命之源．故答案为：过滤；蒸发；蒸馏；蒸馏；灌溉；锅炉用水；饮用．

柱层析为了达到良好的分离效果，装柱时应注意什么，样品上柱应注意什么

装柱方法分为湿法和干法，一般来说，湿法装柱的效果优于干法装柱。

湿法装柱： 先将柱层析的填料活化处理后浸润在适宜的有机溶剂中，使之处于有机环境。装柱时在层析柱自下而上依次填入硅烷花玻璃棉→石英砂→已处理好的层析填料，一边装柱一边用。。。

如何使用柱层析色谱对处理好的样品进行分离提出

色谱定性的依据是保留值，如LC的保留时间，TLC的Rf值。 1.与对照品比对，若一致，则有可能是同一物质，若不一致，则肯定不是同一物质。注意前者的“有可能”，因为保留值一致的物质，很多时候并非同一物质，比如一对手性化合物，某些同分异构体等等。 2.在TLC上，还可以根据斑点的颜色来进一步判断，以及使用显色剂后的斑点颜色，和荧光。 3.还有一种方法是直接用相对保留值来计算，比较典型的是GC对正构烷烃的定性，因为有沸点的差异，每增加一个-CH2-，保留增加若干。这个在有机化学的教材上都要讲的。 4.另一个方式是：用色谱分离，得到纯品，再用其他技术定性，不过这已经不是单纯的色谱分析了。 5.最后要说的是联用技术，如GC-MS，LC-MS等，不过这也已经不是单纯的色谱了，定性的工作主要有MS、IR等来完成。 想了想，应该很全了。