杂交瘤细胞融合

一：融合后的杂交瘤细胞怎么了

细胞融合是一个随机的物理过程.在小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞混合细胞悬中,经融合后细胞将以多种形式出现.如融合的脾细胞和瘤细胞、融合的脾细胞和脾细胞、融合的瘤细胞和瘤细胞、未融合的脾细胞、未融合的瘤细胞以及细胞的多聚体形式等.正常的脾细胞在培养基中存活仅5～7天,无需特别筛选,细胞的多聚体形式也容易死去.而未融合的瘤细胞则需进行特别的筛选去除.细胞DNA合成一般有两条途径.主途径是由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,叶酸作为重要的辅酶参与这一合成过程.另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经次黄嘌呤磷酸核糖转化酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）的催化作用合成DNA.细胞融合的选择培养基中有三种关键成分：次黄嘌呤（hypoxanthine,H）、氨甲蝶呤（aminopterin,A）和胸腺嘧啶核苷（thymidine,T）,所以取三者的字头称为HAT培养基.氨甲蝶呤是叶酸的拮抗剂,可阻断瘤细胞利用正常途径合成DNA,而融合所用的瘤细胞是经毒性培养基选出的HGPRT－细胞株,所以不能在该培养基中生长.只有融合细胞具有亲代双方的遗传性能,可在HAT培养基中长期存活与繁殖.有限稀释与抗原特异性选择：由于细胞融合是一个随机的过程,在已经融合的细胞中,有相当比例的无关细胞的融合体,需细筛选去除.筛选过程一般分为两步进行：一是融合细胞的抗体筛选,二是在此基础上进行的特异性抗体筛选.将融合的细胞进行充分稀释,使分配到培养板的每一孔中的细胞数在0至数个细胞之间（30％的孔为0才能保证每个孔中是单个细胞）,培养后取上清以ELISA法选出抗体高分泌性的细胞；这一过程常被习惯地称作克隆化.将这些阳性细胞再进行克隆化,应用特异性抗原包被的ELISA找出针对目标抗原的抗体阳性细胞株,增殖后进行冻存、体外培养或动物腹腔接种.

二：制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？

因为B淋巴细胞产生抗体，但它不能进行组培，而骨髓瘤细胞是一种恶性肿瘤细胞，单细胞体，结构简单，能在体外环境下进行组培，杂交后的新细胞具备了骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的共同特点，可以脱离人体环境进行培养扩增。

三：杂交瘤是浆细胞和骨髓瘤细胞的融合吗

杂交瘤细胞是在制备单克隆抗体过程中，用骨髓瘤细胞和B细胞融合而成的细胞。

四：将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合，培养液中融合后的细胞即为杂交瘤细胞 哪错

将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行诱导融合，梗养液中融合后的细胞有杂交瘤细胞，还有两个B淋巴细胞的融合细胞和两个骨髓瘤细胞的融合细胞。

五：为什么有些杂交瘤细胞不能分泌抗体?杂交瘤细胞不是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的杂种细胞么？

杂交瘤细胞既能大量增殖也能分泌抗体，这个说法是正确的，但前提是我们需要的是专一的抗体，在实际免疫过程中，由于采用连续注射抗原的方法，且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞，如果使用的免疫抗原有多个决定簇或纯度不够，从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的，当然融合以后的杂交瘤细胞分泌的抗体就不专一，这就需要必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原决定簇的特异性杂交瘤细胞，还有就是筛选分泌专一抗体效率比较高的杂交瘤细胞。

六：与一般的细胞融合相比，杂交瘤技术有什么特殊地方

杂交瘤技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞。被特异性抗原免疫的小鼠脾细胞（B淋巴细胞）的主要特征是它的抗体分泌功能，但不能在体外连续培养，小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖，即具有所谓永生性。在选择培养基的作用下，只有B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞才能具有持续培养的能力，形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞克隆。

七：林俊杰的师妹是谁？

金莎

《18岁天空》里面的蓝非林

和JJ一起和唱了《被风吹过的夏天》并和JJ共同出演了这个MV，她除了一张专集《空气》，以前还禒过很多KFC的广告。