杂交瘤细胞培养

一：杂交瘤细胞培养

不对，交瘤细胞有癌细胞的特性，不会贴壁生长和接触抑制，是分散在培养液中生长的，不需要使用胰蛋白酶处理细胞

二：培养杂交瘤细胞的培养需要什么环境

杂交瘤细胞用骨髓瘤细胞和B细胞融合而成的细胞，骨髓瘤和B细胞融合后细胞培养的方法如下，供参考:

1．融合后 7~10 天用 HAT 培养液变量换液，以后每隔 2~3 天半量换液一次。

2．两周后可改用 HT 培养液半量换液，或仍用 HAT 培养液。

3．2~3 周后出现杂交细胞集落，细胞个大，圆且透明。

4．待集落增殖生长至 1/3 孔时，应进行抗体检测。

克隆化培养 [软琼脂培养]

1．称 1g 琼脂粉，加入到 100ml 双蒸水中，高压蒸气灭菌，4℃冰箱保存。

2．使用前，1%的琼脂和 2×的 DMEM 培养液在 45℃水浴中分别温浴。

3．二者等体积混合后，立即加入 1.5×107 小鼠脾细胞，混匀。

4．立即到入平皿中，每平皿（直径 10cm）加 10ml，室温中置 15 分钟。

5．另取杂交瘤细胞悬液和 0.5%琼脂等体积混合（0.25%琼脂） ，加 2ml 到预先铺有底层琼脂 的瓶皿内。

6．CO2 温箱培养。

7．10~15 天后，有细胞集落形成，适时移入 24 孔培养板中扩大培养。如用琼脂糖，底层浓 度为 0.6%，上层为 0.3%琼脂。

希望可以帮到你!

三：求助大规模培养杂交瘤细胞

杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠细胞作小鼠骨髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是它的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长，小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖，即所谓永生性。在选择培养基的作用下，只有b细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞才具有持续增殖的能力，形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞，这种杂种细胞叫做杂交瘤细胞。