质粒大提试剂盒

一：大提试剂盒有谁用过天根的大提质粒试剂盒，需要更大浓

我们用的是genemark的大提试剂盒,效果非常好.通常能达到0.5-1ug/ul,一般能提500-1000ul.天根的没有用过.而且,这个试剂盒好像10只装的才几百块钱.

二：质粒小量提取跟大量提取有什么区别

大提质粒和小提质粒的基本原理是一样的，都是通过一定的方法（如加碱裂解）使在细菌内大量扩增的质粒释放出来，然后经过去蛋白去RNA等一系列步骤纯化DNA，最终将DNA提取出来。区别：

1.大提用于大量菌液的提取，100ml-500ml 均可，而小提用的菌液量很少，一般1.5-5ml。

2.一般试剂盒中大提比小提多了溶菌酶、异丙醇（回收沉淀核酸）、含一定量PEG的氯化物（回收质粒DNA）及乙酸铵等，其作用及目的都是有利于细菌的裂解和质粒的纯化，所以大提的产物比小提的量多很多，而且纯度很高。

3.小提一般用于质粒鉴定和对纯度要求不是很高的实验，大提用于质粒的大量提取和转染等纯度要求很高的实验。

三：一般试剂盒提取质粒浓度大概是多少

不同种类的试剂盒提取的浓度都不同。一般产品包装盒中都附有说明书的。

四：为什么提质粒用去除内毒素试剂盒

内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁(cell wall)上的特有成分，主要是脂多糖中的类脂A，在细菌被裂解时被释放出来，由于其化学结构和特性，在质粒的纯化过程中很容易混入质粒DNA一同提取出来。内毒素的存在会严重的影响质粒转染细胞的效率，此外会激活造血细胞（如B细胞、巨噬细胞等）的非特异免疫反应，造成实验的假阳性，所以转染级质粒的提取纯化必须去除内毒素。