一：怎么测定培养细胞的抗氧化酶活性
不知以下几篇文章对你是否有用: 病理性瘢痕中主要氧化酶和抗氧化酶活性测定: www.cqvip.com/...=79320 病理性瘢痕中主要氧化酶和抗氧化酶活性测定: www.cqvip.com/asp/userlink.asp?re=79320
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三：抗氧化酶的测定方法用植物的什么组织进行
抗氧化酶（
SOD
、
POD
、
CAT
）活性测定方法
一、
超氧化物歧化酶（
SOD
）活性测定（氮蓝四唑光化还原法）
1
、试剂的配制
（
1
）
0.05mol/L
磷酸缓冲液
(PBS
，
pH7.8)
：
A
母液：
0.2mol/L
磷酸氢二钠溶液
:
取
Na2HPO4•12H2O
（分子量
358.14
）
71.7g
；
B
母液：
0.2mol/L
磷酸二氢钠溶液：取
NaH2PO4•2H2O
（分子量
156.01
）
31.2g
。
分别用蒸馏水定容到
1000ml
。
0.05mol/L
PBS
（
pH7.8
）的配制：分别取
A
母液
(Na2HPO4)
228.75ml
，
B
母液
(NaH2PO4)
21.25ml
，用蒸馏水定容至
1000ml
。
参考文献：
李合生主编：
植物生理生化实验原理和技术
.
高等教育出版社，
2000
：
267
～
268
。
（
2
）
14.5mM
甲硫氨酸溶液：取
2.1637g Met
用磷酸缓冲液（
pH7.8
）定容至
1000ml
。
（
3
）
30μM EDTA
-Na2
溶液：取
0.001gEDTA-Na2
用磷酸缓冲液定容至
100ml
。
（
4
）
60μM
核黄素溶液：
取
0.0023g
核黄素用磷酸缓冲液定容至
100ml
，
避光保存。
（
5
）
2.25mM
氮蓝四唑
(NBT)
溶液：取
0.1840g NBT
用
PBS
定容至
100ml
，避光保存。
酶液制备：取
0.2g
（可视情况调整）样品（新鲜叶片或根系）洗净后置于预冷的研钵中，
加入
2ml 0.05mol/L
预冷的磷酸缓冲液
（
pH7.8
）
在冰浴上研磨成匀浆，
转入离心管中在
4
℃、
12000g
下离心
20min
，上清液即为酶液。
2
、酶活性测定
（
1
）反应混合液配制
(
以
60
个样为准
)
：分别取
Met
溶液
162ml
，
EDTA-Na2
溶液
0.6ml
，
磷酸缓冲液
5.4ml
，
NBT
溶液
6ml
，核黄素溶液
6ml,
混合后摇匀；
（
2
）分别取
3ml
反应混合液和
30μl
酶液于试管中
（
3
）将试管置于光照培养箱中在
4000 lux
光照下反应
20min
；
同时做两支对照管，其中
1
支试管取
3ml
反应混合液加入
30μl
PBS
（不加酶液）照光后测
定作为最大光还原管，另
1
支只加缓冲液置于暗中测定时用于调零。
（
4
）以不照光的对照管（只有缓冲液并置于暗处）调零后，避光测
OD560(
出现颜色即可
测定
)
。
（
5
）酶活性计算：
SOD
活性单位以抑制
NBT
光化还原
50
％所需酶量（测的样品值要在最
大管的一半左右才合适，否则要调整酶量）为
1
个酶活单位（
u
）
。
SOD
总活性＝
/
（
1/2Ack×
W×
Vt
）
SOD
比活力＝
SOD
总活性
/
蛋白质含量
SOD
总活性以鲜重酶单位每克表示（
u/g FW
）
；比活力单位以酶单位每毫克蛋白表示；
Ack
为照光对照管的吸光度；
AE
为样品管的吸光度；
V
为样品液总体积（
ml,1.6ml
，加入
PBS
的体积
)
；
Vt
为测定时的酶液用量（
ml
，
30ul
）
......余下全文>>
四：怎样测定抗氧化酶活性
不知以下几篇文章对你是否有用:
病理性瘢痕中主要氧化酶和抗氧化酶活性测定:
www.cqvip.com/asp/userlink.asp?re=79320
病理性瘢痕中主要氧化酶和抗氧化酶活性测定:
www.cqvip.com/asp/userlink.asp?re=79320
五：多酚总抗氧化能力的测定原理
你是老板么？
六：自由基清除剂和抗氧化剂有什么区别
线粒体抗氧化剂和ros清除剂的区别
活性氧检测试剂盒是利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的。DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。活性氧检测试剂盒。
研究了三丁基锡(TBT)对大鼠肝脏ROS、抗氧化酶和解毒系统酶的影响.SD大鼠随机分为6组,TBT染毒剂量各组分别为,0,0.1,0.3,1.0,3.0,10.0mg/kg(B?W),连续灌胃7d,第8d处死,取肝脏检测活性氧(ROS)水平、谷胱甘肽转硫酶(GST)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、谷胱甘肽还原酶(GR)活性和谷胱甘肽(GSH)含量.结果表明,ROS随TBT浓度增加而升高,各浓度组均有显著性差异.在0.3,1.0mg/kg时,GST活性升高且具有显著性差异,在3.0,10.0mg/kg有下降趋势;GR活性也升高且具有显著性差异.CAT活性及GSH含量在各浓度组均无明显变化.研究结果提示,染毒各组ROS水平明显升高,而与ROS去除有直接关系的GSH水平和CAT活性没有发生相关的变化,因此TBT在代谢转化过程中产生的自由基不能及时被清除可能是导致ROS水平明显升高的重要原因.
七：做植物抗逆生理实验时测SOD酶为什么会出现负值？
话说有什么办法能解释吗？从理论上来说蓝色越淡，证明SOD活性越高，所以在可见光波长下测定的对照管（不加酶液时）颜色更深才对，但是确实是出现了负数，但是不多，有什么办法吗？
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