双链特异性核酸酶

一：双链特异性核酸酶的1* buffer如何配制

blocking reagent（封闭液）(2-8℃保存)

(bottle 5) 5g

maleic acid buffer 50ml

基于氧化石墨烯（GO）对荧光标记单链DNA探针的荧光猝灭效应以及双链特异性核酸酶（DSN）选择性切割DNA/RNA杂合结构中DNA单链的特性，本文建立了一种新型恒温信号放大方法用于microRNA（miRNA）的高灵敏度检测. 靶标miRNA首先与荧光DNA探针杂交，DSN能够特异性地将杂合双链中的DNA探针水解为碎片但不会降解miRNA，GO对酶切产生的寡核苷酸碎片吸附能力显著降低，使得荧光基团远离GO表面而不被猝灭. 释放出的miRNA可再次发生与荧光DNA探针杂交、DSN酶切等反应，如此反复，可实现恒温条件下一个miRNA分子与多个探针杂交、酶切、释放荧光基团的循环过程，最终体系的荧光信号得到显著放大，通过记录体系的荧光信号即可实现对靶标miRNA的灵敏检测.

二：XP会不会比98更加充分的发挥硬件的性能，从而使游戏运行更顺畅？

作为服役十余年的系统，它已经迎来了自己的归宿。现在，全世界的网友不禁为这一顽强存在于microsoft十余载的系统肃然起敬。只有不断地探索、尝试、创新，才能使系统运行更人性化。这一点，是XP无法与7和8.1相媲美的。

三：核酸酶的发展历史

20世纪70年代，在细菌中陆续发现了一类核酸内切酶，能专一性地识别并水解双链DNA上的特异核苷酸顺序，称为限制性核酸内切酶（restriction endonuclease，简称限制酶）。当外源DNA侵入细菌后，限制性内切酶可将其水解切成片段，从而限制了外源DNA在细菌细胞内的表达，而细菌本身的DNA由于在该特异核苷酸顺序处被甲基化酶修饰，不被水解，从而得到保护。限制性核酸内切酶的研究和应用发展很快，已提纯的限制性核酸内切酶有100多种，许多已成为基因工程研究中必不可少的工具酶。限制性核酸内切酶可被分成三种类型。Ⅰ型和Ⅲ型限制酶水解DNA需要消耗ATP，全酶中的部分亚基有通过在特殊碱基上补加甲基基团对DNA进行化学修饰的活性。Ⅰ型和Ⅲ型酶具有限制和修饰两种作用，而特异性弱，切割位点的序列不固定，不已知，不宜用于基因克隆中。Ⅱ型限制酶水解DNA不需要ATP也不以甲基化或其它方式修饰DNA，能在所识别的特殊核苷酸顺序内或附近切割DNA。因此，被广泛用于DNA分子克隆和序列测定。

四：大肠杆菌外切核酸酶Ⅲ可作用于

这个应该是《生命科学导论》里的题。

大肠杆菌外切核酸酶Ⅲ可作用于：（ A）。

A.双链 DNA B.单链 DNA C.环状双链 DNA D.超螺旋结构 DNA

大肠杆菌(Escherichia coli)外切核酸酶 Ⅲ 催化从 dsDNA 3"-OH 逐一去除单核苷酸的反应，底物为 dsDNA 或线状和带切口或缺口的环状 DNA ，反应结果是在 dsDNA 上产生长长的单链区。该酶还有对无嘌呤 DNA 特异性内切核酸酶活性、 RNase H 活性和 3"-磷酸酶活性（去磷酸）。但不降解核酸内的磷酸二酯键，也不降解单链 DNA 及带 3" 突出的 dsDNA 。该酶持续作用能力不强，产物为切割程度不相上下的群体，有利于分离长短不等的 DNA 。

五：细菌里有没有核酸酶

20世纪70年代，在细菌中陆续发现了一类核酸内切酶，能专一性地识别并水解双链DNA上的特异核苷酸顺序，称为限制性核酸内切酶（restriction endonuclease，简称限制酶）。当外源DNA侵入细菌后，限制性内切酶可将其水解切成片段，从而限制了外源DNA在细菌细胞内的表达，而细菌本身的DNA由于在该特异核苷酸顺序处被甲基化酶修饰，不被水解，从而得到保护。

限制性核酸内切酶的研究和应用发展很快，已提纯的限制性核酸内切酶有100多种，许多已成为基因工程研究中必不可少的工具酶。

限制性核酸内切酶可被分成三种类型。Ⅰ型和Ⅲ型限制酶水解DNA需要消耗ATP，全酶中的部分亚基有通过在特殊碱基上补加甲基基团对DNA进行化学修饰的活性。

Ⅰ型和Ⅲ型酶具有限制和修饰两种作用，而特异性弱，切割位点的序列不固定，不已知，不宜用于基因克隆中。

Ⅱ型限制酶水解DNA不需要ATP也不以甲基化或其它方式修饰DNA，能在所识别的特殊核苷酸顺序内或附近切割DNA。因此，被广泛用于DNA分子克隆和序列测定。