高效液相色谱柱分类

一:高效液相色谱分类

可以按照很多方面分类,你要问哪一种?

按照分离原理分类,大概可以分为:

1.吸附色谱:基于各组分对固定相的吸附能力不同而实现分离的方法。比较常见的色谱柱是火星硅胶、氧化铝、活性炭、聚乙烯、聚酰胺等。用于测定结构异构体。

2.分配色谱:基于样品在流动相和固定相之间溶解度不同的原理实现分离。比较常见的正相氰基柱(正相)和极为普遍的C18色谱柱(反相)。用来测定的东西很多,化工、制药、化妆品行业都经常使用。

3.凝胶色谱:基于根据分子的体积大小和形状不同而达到分离目的。固定相是软质凝胶、半硬质凝胶和硬质凝胶三种。常用于生物方面进行大分子物质的测定。

4.离子交换色谱:基于被测离子在交换剂上具有不同的亲和力而被分离。固定相如多孔性树脂和薄壳型树脂。常用于无机离子和生物物质的检测(如氨基酸、核酸、蛋白质等)

二:高效液相色谱柱子的分类?

依据流动相与固定相的极性可分为正相色谱柱和反相色谱柱,别种的分类基本以此为基础。

三:高效液相色谱中固定相分类?最常用的是哪类?

高效液相色谱柱大致可分为五类:一、高效反相液相色谱柱 以C18为代表的高效反相液相色谱柱一直被描述为药物发现、开发、方法验证(validation)的心脏! 高效反相液相色谱柱也极其广泛应用在药物代谢及动力学、生命科学、医疗健康、生物分析检测、毒品和兴奋剂检测、食品安全分析、环境分析、军事、国土安全等领域! 高效反相液相色谱制备柱也是最重要的分离纯化技术之一! 无论是过去,现在和可预见的未来, 以球形B型硅胶(5um 或 3um)为材料骨架的高效反相液相色谱柱在实际应用中永远占有统治地位!常规HPLC方法的开发几乎总是从C18作为出发点,反相色谱占了80%以上的应用。 过去数十年来, 无数努力集注于: 1) 改善硅胶的品质, 优化键合化学; 2)开发新颖的材料骨架替代硅胶。十多年前, 使用有机硅材料取代无机硅材料作为起始原料生产球形硅胶代表一个划时代的革命! 生产的球形硅胶命名为B型球形硅胶。无机A型硅胶重金属含量很高, 硅胶表面若干位置严重酸化及螯合效应等导致许多碱性化合物回收率低。球形B型硅胶重金属含量很低, 在非常大的程度上消除了A型无机硅胶表面若干位置严重酸化及螯合效应等问题。用B型球形硅胶合成高效液相色谱填料, 导致高效液相色谱柱产品质量有质的飞跃!然而,另一方面,基于客户的大量反馈和我们对几乎所有色谱厂商产品的评估, 我们相信键合化学问题没有获得很好的解决。具体体现在:

(1) “纯粹”反相机理的键合相例如C18和C8市场上仍然是单功能,三功能和聚合物键合相"鱼目混杂"。 (2) 键合相封端问题没有获得很好的解决, 一直是困扰色谱领域最大的问题! 迄今为止全部的尝试只获得有限的成功。

(3) 极性嵌入式(Polar embedded)键合相

极性嵌入式(Polar embedded)键合相是C18高效反相液相色谱"卫星群"中最重要的产品, 是C18和C8键合相最重要的补充。

极性嵌入式(Polar embedded)键合相起源于Supelco ABZ。Supelco ABZ的键合方法是用aminopropyl键合相和长链羧酸缩合反应形成一个C16酰胺。 那么市场上的极性嵌入式(Polar embedded)键合相群的主要问题是什么? 极性嵌入式键合相和所谓的水相C18主要问题是键合相泄漏, 键合相不稳定等。两者之间的内在差异是: 极性嵌入式键合相键合相泄漏和键合相不稳定等问题能够获得很好的解决, 但使用极性硅烷试剂封端的所谓的水相C18键合相键合相泄漏和键合相不稳定等问题是不可逆转的。 在类似C18链长度的硅烷试剂中嵌入极性酰胺或酰酯, 使得键合相亲水, 在100%水相条件下稳定。但按照类似C18的键合化学, 键合覆盖率低, 键合相不稳定。 Chrom-Matrix InnovationTM PEG键合相是非常极性的产品, 但测试结果表明: PEG键合相非常稳定, 在LC-MS测试中没有检测到泄漏。这一成功和我们在胶体与界面科学领域的长期经验帮助我们成功开发了新型催化条件下新的键合化学。加上超临界流体技术封端, Chrom-Matrix InnovationTM 极性酰胺或酰酯键合相比那么市场上的极性嵌入式(Polar embedded)键合相群稳定得多。色谱柱产品质量和寿命有质的飞跃! 即使这样, LC-MS测试显示: Chrom-Matrix InnovationTM 极性酰胺或酰酯键合相仍然有非常低的泄漏。(4) 无泄漏低孔和高比表面......余下全文>>

四:高效液相色谱的主要类型有哪些?

①示差折光化学检测器   ②紫外吸收检测器   ③紫外一可同分光光度检测器   ④二极管阵列紫外检测器   ⑤荧光检测器 矗 ⑥电化学检测器

五:HPLC液相色谱柱中常用的专用色谱柱有哪些

从原料上分,分有机填料和无机填料,首先做成微米级的微球作为母粒,至于想要实现特殊的功能主要是在微球表面键合特殊的官能基团,专用柱这个应该不存在。

六:常见的液相色谱柱检测器有哪几种

光学类检测器

1、紫外吸收检测器(UVD)是目前HPLC中应用最广泛的检测器。它的主要特点是灵敏度高,线性范围宽,对流速和温度变化不敏感,可用于梯度洗脱。它要求被检测样品组分有紫外吸收,属于选择性检测器。

2、二极管阵列检测器(PDAD)是20世纪80年代才出现的一种光学多通道检测器,它可以看作是UVD的一个分支。在对每个洗脱组分进行光谱扫描,经计算机处理后,得到光谱和色谱结合的三维图谱。其中吸收光谱用于定性(确证是否是单一纯物质),色谱用于定量,常用于复杂样品(如生物样品、中草药)的定性定量分析。

3、荧光检测器(FLD)同样属于选择性检测器,其灵敏度在目前常用的HPLC检测器中是最高的,应用也较多,仅次于UVD。它适用于能激发荧光的化合物。很多与生命科学有关的物质,如氨基酸、胺类、维生素、甾族化合物及某些代谢药物都可以用荧光法检测。荧光检测器在生物样品痕量分析中很有用,尤其在用荧光衍生后,可以检测很微量的氨基酸和肽。

通用型检测器

1、示差折光检测器(RID)是一种通用型检测器,只要被测组分与洗脱液的折光指数有差别就可使用。生命科学中常遇到各类糖类化合物,没有紫外吸收,一般常用示差折光检测器。它的通用性比UVD广,但灵敏度要低,对温度变化敏感,并与梯度洗脱不相容,因而限制了它的使用。

2、蒸发光散射检测器(ELSD)也是一种通用型的检测器,可检测挥发性低于流动相的任何样品,而不需要样品含有发色基团。ELSD的响应值与样品的质量成正比,因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物。ELSD灵敏度比RID高,对温度变化不敏感,基线稳定,可用于梯度洗脱。现在ELSD已被广泛应用于碳水化合物、类脂、脂肪酸和氨基酸、药物以及聚合物等的检测。

3、质谱检测器(MSD)是另一种通用型检测器,在灵敏度、选择性、通用性及化合物的分子量和结构信息的提供等方面都有突出的优点。但它的昂贵操作费用和复杂性限制了它的推广应用。

希望对你有所帮助。

七:如何选择高效液相色谱柱

这个问题范围有点大,一般有药典方法、国标或者行业监测标准的,按照方法来选产品,可以跟供应商讲你要做什么标准方法,让他们根据方法给你推荐柱子,这个一般的厂家和经销商都会做的,这样的好处是做的出什么问题你可以随时要求他们提供技术指导,如果做不出来可以调换或者退货;如果没有固定的方法需要稜己开发,可以查一些文献,看看之前别人做的时候用的什么柱子,再做个对比选择,如果实在没有参考的话,可以按照这个树状图来选:

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