大肠杆菌培养基配方

一：大肠杆菌培养基

一般大肠杆菌都使用LB 培养基，

其成分如下：

胰化蛋白胨 10g/L

酵母提取物 5g/L

NaCl 10g/L

如果是固体的培养基，就需要再加入15克琼脂粉

pH 7.4~7.6

实验室里，配好之后就去灭菌锅里灭菌就好了。

看看另外一个网友的相似的答案，希望对你有启发:)

LB培养基是互种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。它含有酵母提取物、蛋白胨和NaCl。其中酵母提取物为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源，而NaCl提供无机盐。

在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。琼脂在40℃时凝固，通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。

二：大肠杆菌培养基

培养基的基本成分

一般的培养基均需要碳源、氮源、无机盐和水等（具体见教材15页“100mL牛肉蛋白胨培养基的营养构”）。

（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基

1.牛肉膏蛋白胨固体培养基配方（即计算）

物质

牛肉膏

蛋白胨

NaCl

琼脂

水

重量

5g

10g

5g

20g

定溶至1000mL

2.称量

按比例称取各种物质，注意事项：牛肉膏要放在称量纸上称量，牛肉膏、蛋白胨都易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖。

3.溶化：先将牛肉膏连同称量纸一起放入烧杯，加少量水，加热至牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。加入蛋白胨和氯化钠，用玻璃棒搅拌使之溶解，再加入琼脂，搅拌，待溶解后，加自来水定溶至100mL。

4.灭菌：将配制好的培养基放到锥形瓶中（瓶口加棉塞，包上牛皮纸），连同培养皿（3～5套，用几层报纸包好）一起放到高压锅内灭菌。

5.倒平板：待培养基冷却到50OC左右时倒平板（如教材17图示）。

（二）纯化大肠杆菌

微生物接种方法常见的有平板划线法和稀释涂布平板法。

1.平板划线法

通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面

在数次划线后可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体称菌落。

2.稀释涂布平板法

（1）将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释

度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行

培养。

（2）在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物

将分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单

个的菌落。

（3）稀释涂布平板法操作过程分两个步骤，

即系列稀释操作和涂布丁板操作。

系列稀释操作

(1)将分别盛有9mL水的试管灭菌并编号。

(2)用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中，轻压橡皮头，吹吸三次使之充分混匀。

(3)从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入第三支试管中，重复步骤2，直至到第六支试管。

涂布平板操作

(1)将涂布器浸在盛有70％的酒精的烧杯中。

(2)取少量菌液（不超0.1mL），滴加到培养基表面。

(3)将沾有酒精的涂布器在火焰上引燃，火熄后冷却

8～10s。

(4)用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。

3.培养12h和24h后，观察到的实验结果相同吗？如果不同，请分析产生差异的原因？

培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同。随着时间的延长、菌落的不断生长，使菌落不断增大。...余下全文>>

三：如表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题．成分含量

（1）大肠杆菌需要从培养基中获得碳源，因此其同化作用类型是异养型；大肠杆菌在生态系统的成分中充当分解者．（2）微生物培养时，关键是防止外来杂菌的感染；对于培养基和培养皿需要进行灭菌处理，人的双手需要消毒处理；空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能让蛋白质变性，同时还能破坏DNA的结构．（3）伊红美蓝是鉴定大肠杆菌的试剂，因此该培养基从用途上属于鉴别培养基；若要分离能分解尿素的细菌，则需要保证培养基中以尿素为唯一氮源，即将蛋白胨换成尿素；鉴定分解尿素的细菌，需要使用酚红指示剂．（4）微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法；由一个细菌繁殖产生子细胞群体就是菌落．（5）大肠杆菌属于原核生物，没有成形的细胞核．A、制备果酒使用的微生物是酵母菌，属于真核生物，A错误；B、制作果醋使用的微生物是醋酸菌，属于原核生物，B正确；C、制作泡菜使用的微生物是乳酸菌，属于原核生物，C正确；D、制作腐乳的微生物主要是毛霉，属于真核生物，D错误．故选：BC．故答案为：（1）异养型 分解者（2）防止外来杂菌的入侵 灭菌　 消毒 蛋白质变性（3）鉴别 蛋白胨 尿素 酚红指示剂（4）平板划线法 稀释涂布平板法　 菌落（5）BC