微生物实验室培养

一：微生物的实验室培养

需要控制的主要是营养条件和环境条件

营养条件包括：碳源（速效还是缓效）、氮源（速效还是缓效）、常见的金属离子（如铁、钾、钠、钙、镁等）、微量元素（如钼、钴等）、生长因子等条件。

环境条件包括溶氧量（常为液体培养基需要考虑的因素）、水分、温度、光照（有些微生物实验需要控制光照）、环境pH值等。

不少微生物初次分离培养需要一定浓度的二氧化碳。如果是厌氧生物得根据厌氧程度，在专门的厌氧培养箱中培养。

二：微生物培养需要什么条件

微生物的实验室培养：

营养构成：

各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

无菌技术：

(1)关键：防止外来杂菌的入侵。

(2)具体操作

①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。

②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。

③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。

④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。

(3)消毒和灭菌

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。

接种方法：

平板划线法和稀释涂布法。

（1）平板划线操作：

①挑取他含菌样品：选用平整、圆滑的接种环，按无菌操作法挑取少量菌种。

②划A区：将平板倒置于煤气（酒精）灯旁,左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面，有培养基一面向着煤气灯（这时皿盖朝上，仍留在煤气灯旁)，右手拿接种环先在A区划3—4条连续的平行线(线条多少应依挑菌量的多少面定）。划完A区后应立即烧掉环上的残菌，以免因菌过多而影响后面各区的分离效果。在烧接种环时，左手持皿底并将其覆盖在皿盖上方(不要放入皿盖内)，以防止杂菌的污染。

③划其他区：将烧去残菌后的接种环在平板培养基边缘冷却一下，并使B区转到上方，接种环通过A区（菌源区）将菌带到B区，随即划数条致密的平行线。再从B区作C区的划线。最后经C区作D区的划线，D区的线条应与A区平行，但划D区时切勿重新接触A、B区，以免极该两区中浓密的菌液带到D区，影响单菌落的形成。随即将皿底放入皿盖中。烧去接种环上的残菌。

④等平板凝固后，将平板倒置。

（2）稀释涂布法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。能够测定样品中活菌数的方法是：稀释涂布平板法。

三：微生物实验室设计规划要求有哪些

微生物实验室组成一般包括：准备室、微生物培养室、器械消毒及清洗室、纯水室、检测室、菌种室、储藏室等。微生物实验根据工作领域（食品、药品、医疗等）和性质（教学、生产、研究、检测等）的不同，实验室组成和规模有很大差别。

二、微生物实验室平面布局

微生物实验室应设置成独立的区域，与其他实验室分开，门口设有门禁，非相关人员不得进入，各室根据工作内容合理布局，既方便工作又不互相影响。入口处设置集中式更间，培养室根据培养条件和种类不同可设置多间（如霉菌培养室、细菌培养室、固体培养室、液体培养室等）。

（1）洁净实验室：自成一区，安排在实验室的靠边角落处，用密封门限制人员的进出，把有洁净要求的房间设置在人员干扰较少的地方，把辅助房间设置在外部。考虑微生物实验操作流程，方便人流与物流的份额里。为控制人员的出入（人流），只设有一个密封门进入微生物实验室主洁净区，操作人员进入走廊然后进入准备间，并从准备间分别经过一更、二更、缓冲进入操作区。物流则由传递窗实现。排风口装有高效过滤器，送风口装有高效过滤静压箱，室内送排风曹勇上送下排方式，室内排风单侧布置，不得有障碍。余压阀自动调节室内压力，保持正压洁净状态。

（2）洗涤室：洗涤室房间的尺寸根据日常工作量决定，一般不小于一个单间，洗涤室的位置靠近培养室，给排水设施完善，洗涤台面须耐热耐酸，室内配器皿柜，滴水架，干燥架，边台等，地面应有良好的排水坡度和地漏。

（3）准备室：设实验台、试剂柜等要绝缘、耐热、实验台要耐水耐腐蚀：设置上下水装置，涉及粉末，筛分等操作，需配置相应的设备。局部排风，设排风柜。

（4）培养室：主要配置各种培养箱、摇床，要求温度较恒定，有足够的 电力供应。

三、实验室设计与装修

（1）必须为实验室安全运行、清洁和维护提供足够的空间。

（2）实验室墙壁、天花板和地板应当光滑、易清洁、防渗漏并耐化学品和消毒剂的腐蚀。地板应当防滑。

（3）实验台面应是防水的，并可耐消毒剂、酸、碱、有机溶剂和中等热度的作用。

（4）应保证实验室内所有活动的照明，避免不必要的反光和闪光。

（5）实验室器具应当坚固耐用，在实验台、柜和其他设备之间及其下面要保证有足够的空间以便进行清洁。

（6）应当有足够的储存空间来摆放随时使用的物品，在实验室的工作区外还应当提供另外的可长期使用的储存间。

（7）应当为安全操作以及储存镕剂、压缩气体和液化气提供足够的空间和设施。

（8）实验室的门应有可视窗，并达到适当的防火等级，最好能自动关闭

（9）安全系统应当包括消防、应急供电、应急淋浴以及洗眼设施。

（10）有可靠和充足的电力供应和应急照明，以保证人员安全离开实验室。

（11）设备的设计、建造与安装应便于操作、易于维护、清洁、清除污染和进行质量检验。应尽量避免使用玻璃以及其他易碎的物品。

四：微生物实验室用的细菌培养皿哪里有？

医疗设备仪器公司或商店都有。