一:原核生物中表达真核蛋白应该注意什么问题
因为原核生物缺乏翻译后的修饰,所以表达的真核蛋白和真核中表达有所差异,可能没有生物学活性等,但是要是做免疫原应该没问题;
基因需为cDNA,不能含有内含子,原核细胞不能对mRNA进行剪切;
要分析DNA序列信息,分析其密码子,由于原核与真核生物的密码子偏好性不同,所以有时可能会出现稀有密码子而影响表达的情况;
要注意你要表达蛋白的大小问题,一般情况下大于70KD的蛋白在原核菌种不容易表达或表大量低;
原核表达出来的一般是包涵体,所以蛋白的复性很关键,否则表达出来了也不能用,没有活性。
二:目前原核表达都采用什么方式,国内做原核蛋白表达服务的都有那些公司
原核表达采用的方式多位大肠杆菌系统表达,详细的实验步骤及原理,可到网上搜索相关资料。目前国内做原核蛋白表达服务的,有不少公司,但是有很多公司都是只接单不生产外包出去的,因此,找公司的时候要擦亮双眼了~也有的公司是技术达不到,实验成功率有待考究,所以可多问问几家公司对比对比,提供一点相关信息,tieba.baidu.com/p/4443692510
希望对你有所帮助~
三:原核表达载体和真核表达载体的区别
原核载矗可以将真核基因表达,但是表达出来的蛋白是没有活性的,因为缺少翻译后修饰系统。。。真核的表达载体呢 由于比较大 不适合大量快速扩增,所以要在其载体上构建可以在原核生物 如大肠杆菌中复制的所需的复制原件 。。。。综上 在应用的时候 要构建 穿梭质粒 可以穿梭于 原核和 真核 呵呵 还有就是 原核表达载体的基本元件和真核的有不同的地方 。。。。。总觉得不够正确答案 。。。。。有些人缘的蛋白在原核里没有蛋白翻译后修饰,表达后没有活性,这时候就得在真核里表......
四:原核表达 目的蛋白不表达怎么办
目的蛋白的表达跟基因本身关系密切,载体,表达条件关系也很大。空载体能表达不代表你的蛋白能在该条件下表达。
五:原核蛋白表达,总是在沉淀中,怎么解决
应该是原核表达宿主菌比较准确 原核表达宿主菌之前可以表达蛋白,放一段时间不表达蛋白原因很多 首先要确认其他条件是否也有改变,比如其他基因,质粒载体,表达条件等等 原核表达宿主菌保存条件没有控制好可能导致宿主菌退化,被污染等等,结果就造成蛋白表达变少或者不表达。