荧光探针识别机理

一：纳米荧光探针摧灭原理

通过一间隔基S(space)和荧光团F(fluorophore)相连而构建。其中荧光团部分是光能吸收和荧光发射的场所，识别基团部分则用于结合客体，这两部分被间隔基隔开，又靠间隔基相连而成一个分子，构成了一个在选择性识别客体的同时又给出光信号变化的超分子体系。PET荧光探针中，荧光团与识别基团之间存在着光诱导电子转移，对荧光有非常强的淬灭作用，因此在未结合客体之前，探针分子不发射荧光，或荧光很弱，一旦识别基团与客体相结合，光诱导电子转移作用受到抑制，甚至被完全阻断，荧光团就会发射出强烈荧光（图1-1）。PET荧光探针作用机制可由前线轨道理论来说明（图1-2）。由于与客体结合前后，荧光强度差别非常大，呈明显的“关”、“开”状态，因此这类探针又被称做荧光分子开关。

二：用于基因分型的荧光探针PCR原理是什么 10分

原理是：先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链，然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物，即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段，一般需20-30个碱基对，过少则难保持与DNA单链的结合。引物与互补DNA结合后，以靶DNA单链为模板，经反链杂交复性（退火），在Taq DNA聚合酶的作用下以4种三磷酸脱氧核苷（dNTP）为原料按5'到3'方向将引物延伸、自动合成新的DNA链、使DNA重新复制成双链。然后又开始第二次循环扩增。引物在反应中不仅起引导作用，而且起着特异性的限制扩增DNA片段范围大小的作用。新合成的DNA链含有引物的互补序列，并又可作为下一轮聚合反应的模板。如此重复上述DNA模板加热变性双链解开—引物退火复性—在DNA聚合酶作用下的引物延伸的循环过程，使每次循环延伸的模板又增加1倍，亦即扩增DNA产物增加1倍，经反复循环，使靶DNA片段指数性扩增。

PCR的扩增倍数Y=（1+E）n,这里Y是扩增量，n为PCR的循环次数。E为PCR循环扩增效率。设PCR扩增效率E为100%、循环次数n=25次，靶DNA将扩增到33554432个拷贝，即扩增3355万倍：若E为80%、n=20、则扩增数量将下降到1408865拷贝，即扩增产物约丢失93%，若E=100%，n=20，则扩增数量减少1048576个拷贝，扩增产物约减少97%。可见PCR循环扩增效率及循环次数都对扩增数量有很大影响。PCR扩增属于酶促反应，所以，DNA扩增过程遵循酶促动力学原理。靶DNA片段的扩增最初表现为直线上升，随着靶DNA片段的逐渐积累，当引物—模板/DNA/聚合酶达到一定比值时，酶的促化反应趋于饱和，此时靶DNA产物的浓度不再增加，即出现所谓平台效应。PCR反应达到平台期的时间主要取决于反应开始时样品中的靶DNA的含量和扩增效率，起始模板量越多到达平台期的时间就越短、扩增效率越高到达平台期的时间也越短。另外酶的含量，dNTp 浓度，非特异性产物的扩增都对到达平台期时间有影响。

三：荧光探针浓度过大 荧光强度为什么会降低

1。自吸收加强

2。浓度过大，激发分子碰撞几率增大。其它驰豫（荧光外）机理增强。

四：什么时候萘酰亚胺作为分子荧光探针

你好

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ML28-6 磺酰亚胺新型加反应研究

ML28-7 纯水相Reformatsky反应研究

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ML28-10 CO气相催化偶联制草酸二乙酯宏观力研究

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ML28-15 醇烯合异丙醚研究

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ML28-19 新型手性氨基烷基酚合及其称诱导

ML28-20 水滑石类化合物催化尿素醇解合机碳酸酯研究

ML28-21 膜催化氧化丁烷制顺酐

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ML28-26 核酸、蛋白质相互作用研究及毛细管电泳电化发光应用

ML28-27 H-磷酸酯合苄基膦酸肽衍物应用

ML28-28 微波辐射三价锰离促进2-取代苯并噻唑合研究

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ML28-30 新型膦配体合及烯烃氢甲酰化反应研究

ML28-31 肼与羰基化合物反应及其机理研究

ML28-32 离液体条件杂环化合物合研究

ML28-33 超声波辐射、离液体及溶剂合技术机化反应应用研究

ML28-34 机含氮催化剂设计、合及称反应应用

ML28-35 金属参与称机化反应研究

ML28-36 黄酮及噻唑类衍物合研究

ML28-37 钐试剂产卡宾新及其机合应用

ML28-38 琥珀酸酯类内给电体化合物合与性能研究

ML28-39 3-甲基-4-芳基-5-（2-吡啶基）-124-三唑铜（II）配合物合、晶体结构及表征

ML28-40 直接合二甲基二氯硅烷实验研究

ML28-41 性条件傅氏烷基化反应初步探索IIβ-溴代醚新合初步探索

ML28-42 几种氧化苦参jian类似物合

ML28-43 环丙烷环丙烯类化合物合研究

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ML28-45 新型C2轴称缩醛化合物合研究

ML28-46 环状酰亚胺光化性质研究及消毒剂溴氯甘脲制备

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ML28-48 富硫功能化合物设计与合

ML28-49 ABEEM－σπ模型Diels-Alder反应应用

ML28-50 快速确定丙氨酸-α-肽构象稳定性新

ML28-51 SmI2催化合含氮杂环化合物研究及负载化稀土催化剂探索

ML28-52 新型金属卟啉化合物合及用作NO供体研究

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ML28-54 甾体—核苷缀合物合及其性质研究

ML28-55 非键作用库仑模型预测甘氨酸-α-肽构象稳定性

ML28-56 酸基机-机杂化材料合结构表......余下全文>>

五：武汉大学药学院的科学研究

1、药物化学药物设计、合成及技术开发；手性技术与药物合成研究；天然药物化学及先导化合物研究以及新药的发现与开发。基于类型衍生化（Lead generation）与最佳化合物设计（Lead optimization）和计算机辅助药物设计，利用化学合成中的新方法、新技术，例如定向合成，组合合成、生物合成、半合成等进行合成。将药物筛选的过程在计算机上模拟，对化合物可能的活性作出预测，进而对比较有可能成为药物的化合物进行有针对性的实体筛选。在此基础上积累与建设化合物库，包括虚拟化合物库的建设与收集。掌握天然药物化学基本技能，包括有效部位和有效成分的分离和结构分析，在功效筛选基础上进行结构改造，优化与先导化合物的发现。2、药剂学将药物制成适合临床需要并符合一定质量标准的药剂是新药开发和研制的重要一环节。药物剂型对于新药的开发有着重要的作用。学习包括片剂、胶囊剂、溶液剂、乳剂、混悬剂等常规制剂的研究方法；开发和研制化学药物制剂、中药与天然药物制剂以及生物技术药物制剂。在开发传统辅料的基础上，建立具有缓控释作用和靶向作用的辅料系统和载体，采用新技术研究药物与辅料之间的相互作用，以期优化药物辅料的性能，改良药物的性能，提高药物生物利用度。通过调节药物辅料的组分和结构来控制材料的降解速度满足不同药物控制释放的要求。通过适宜的药物载体，大幅度提高了药物在靶向器官中的分布，提高了药物疗效。尤其是利用靶向基团特异性识别功能可以有效的提高抗癌药物的定向释放能力，同时也极大地降低抗癌药物的毒副作用。利用对外界变化因素，如光、温度、电场及特定的化学物质等的变化来调节药物的释放，改善药物的临床应用的顺应性，更好服务于患者。3、生药学生药学是应用本草学、生物学、化学和药理学等基础学科理论研究生药基原形态、种质资源、品种鉴定、质量评价、化学成分、药理作用以及保护利用的一门重要的学科。现代生药学已派生出许多新的研究领域，如药源生物DNA条码识别与指纹图谱技术、中药材GAP种植系统工程与关键技术、药用植物生物技术、药源生物生态适应性及产地变迁规律、濒危药源生物替代品等效性与安全性评价等。本学科主要研究方向有：生药种质资源及其评价；生药品种鉴定及新资源发掘；生药稀缺基原替代物的功效与毒性；生药基原道地产区变迁规律；生药活性成分及其物质基础；生药有效成分及其质量控制；生药分子标记技术及其基原的DNA条码识别技术。4、药物分析学药物分析学是新药研究与开发中必不可少的一门重要学科。主要研究内容为药物的分离、检测与鉴定相关的基础理论、关键技术、仪器装置及分析方法学。主要研究方向有：基于液相色谱、毛细管电泳、毛细管电色谱等分离技术以及与质谱联用技术的药物分析新方法研究；基于现代仪器分析的药物筛选新模型与方法研究；手性药物色谱柱材料与分析新方法研究；药物分子识别纳米材料与荧光探针试剂研究；药物分离与检测集成化微芯片、微小化药物分析装置的研制；中药指纹图谱研究，中药化学成分分析；单个细胞中的化学成分分析；单细胞水平药物动力学研究等。5、微生物与生化药学生物药物包括生物技术药物和天然生物药物，是世界各国现代医药产业发展的重点领域之一。本研究方向主要涉及蛋白药物、糖类药物、核酸药物等现代生物药物的研究与开发，研究手段包括基因工程、蛋白质工程、细胞工程、化学生物学等现代生物学与现代化学方法与技术，具体研究方向主要包括生物技术药物设计关键技术、新型成药基因与成药蛋白的鉴定、基因工程药物的研究与开发、糖类药物的研究与开发、规模化细胞培养技术、天然生物药物的部分合成、传统生物药物（如中药）的......余下全文>>

六：实时荧光定量PCR的原理

所谓实时荧光定量PCR技术 ，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。检测方法1.SYBRGreenⅠ法：在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR定量PCR扩增荧光曲线图PCR产物熔解曲线图（单一峰图表明PCR扩增产物的单一性）2.TaqMan探针法：探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。服务流程1.客户认真写好订单，提供待检基因相关信息；2.签订技术服务合同，支付预付款（30-50%)；3.设计合成定量PCR引物（或客户提供文献引物委托本公司合成）；4.DNA/RNA的抽提、定量、RNA反转录；5.PCR预实验，主要检测引物的特异性和扩增效率；6.正式定量实验：对所有样品上机检测；7.实验结果和数据分析，形成报告。收费标准优惠包干价：120元/样/基因（SYBRgreenI法，相对定量）（含RNA提取，反转录，引物合成费用，上机测试费用（3个重复）；一个内参免费（内参3个重复） Ct值（Cycle threshold，循环阈值）的含义为：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数（如图1所示）。1. 荧光阈值（threshold）的设定PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号，荧光阈值的缺省（默认）设置是3-15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍，即：threshold = 10*SDcycle 3-152. Ct值与起始模板的关系每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，公式如下。Ct=-1/lg(1+Ex)*lgX0+lgN/lg(1+Ex)n为扩增反应的循环次数，X0为初始模板量，Ex为扩增效率，N为荧光扩增信号达到阈值强度时扩增产物的量。起始拷贝数越多，Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标代表起始拷贝数的对数，纵坐标代Ct值。因此，只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。 实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种：荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下：1. TaqMan荧光探针：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'－3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析，又可分析基因突变（SNP），有望成为基因诊断和个体化用药分析的首选技术平台。2. SYBR荧光染料：在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的......余下全文>>