一：用于基因分型的荧光探针PCR原理是什么 10分
原理是：先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链，然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物，即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段，一般需20-30个碱基对，过少则难保持与DNA单链的结合。引物与互补DNA结合后，以靶DNA单链为模板，经反链杂交复性（退火），在Taq DNA聚合酶的作用下以4种三磷酸脱氧核苷（dNTP）为原料按5'到3'方向将引物延伸、自动合成新的DNA链、使DNA重新复制成双链。然后又开始第二次循环扩增。引物在反应中不仅起引导作用，而且起着特异性的限制扩增DNA片段范围大小的作用。新合成的DNA链含有引物的互补序列，并又可作为下一轮聚合反应的模板。如此重复上述DNA模板加热变性双链解开—引物退火复性—在DNA聚合酶作用下的引物延伸的循环过程，使每次循环延伸的模板又增加1倍，亦即扩增DNA产物增加1倍，经反复循环，使靶DNA片段指数性扩增。
PCR的扩增倍数Y=（1+E）n,这里Y是扩增量，n为PCR的循环次数。E为PCR循环扩增效率。设PCR扩增效率E为100%、循环次数n=25次，靶DNA将扩增到33554432个拷贝，即扩增3355万倍：若E为80%、n=20、则扩增数量将下降到1408865拷贝，即扩增产物约丢失93%，若E=100%，n=20，则扩增数量减少1048576个拷贝，扩增产物约减少97%。可见PCR循环扩增效率及循环次数都对扩增数量有很大影响。PCR扩增属于酶促反应，所以，DNA扩增过程遵循酶促动力学原理。靶DNA片段的扩增最初表现为直线上升，随着靶DNA片段的逐渐积累，当引物—模板/DNA/聚合酶达到一定比值时，酶的促化反应趋于饱和，此时靶DNA产物的浓度不再增加，即出现所谓平台效应。PCR反应达到平台期的时间主要取决于反应开始时样品中的靶DNA的含量和扩增效率，起始模板量越多到达平台期的时间就越短、扩增效率越高到达平台期的时间也越短。另外酶的含量，dNTp 浓度，非特异性产物的扩增都对到达平台期时间有影响。
二：纳米荧光探针摧灭原理
通过一间隔基S(space)和荧光团F(fluorophore)相连而构建。其中荧光团部分是光能吸收和荧光发射的场所，识别基团部分则用于结合客体，这两部分被间隔基隔开，又靠间隔基相连而成一个分子，构成了一个在选择性识别客体的同时又给出光信号变化的超分子体系。PET荧光探针中，荧光团与识别基团之间存在着光诱导电子转移，对荧光有非常强的淬灭作用，因此在未结合客体之前，探针分子不发射荧光，或荧光很弱，一旦识别基团与客体相结合，光诱导电子转移作用受到抑制，甚至被完全阻断，荧光团就会发射出强烈荧光（图1-1）。PET荧光探针作用机制可由前线轨道理论来说明（图1-2）。由于与客体结合前后，荧光强度差别非常大，呈明显的“关”、“开”状态，因此这类探针又被称做荧光分子开关。
三：荧光化学传感器和荧光探针的区别
不一样
荧光，又作"萤光"，是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射，吸收光能后进入激发态，并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光(通常波长在可见光波段);而且一旦停止入射光，发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。在日常生活中，人们通常广义地把各种微弱的光亮都称为荧光，而不去仔细追究和区分其发光原理。
四：荧光探针的种类有哪些
FAM
MGB。。。。
五：研究生做荧光探针有前途吗？
挺好的，荧光探针现在做的人不少，用处很大，有取代放射性标记技术的趋势，能检测追踪和定量测定。用处很大，发文章的概率大，影响因子较高。
六：什么是小分子荧光探针
荧光探针是建立在光谱化学和光学波导与测量技术基础上，选择性的将分析对象的化学信息连续转变为分析仪器易测量的荧光信号的分子测量装置。
荧光探针受到周围环境的影响，使其发生荧光发射发生变化，从而使人们获知周围环境的特征或者环境中存在的某种特定信息
盯敏度高,选择性好,使用方便,成本低,不需预处理,不受外界电磁场影响,远距离发光.
识别基团决定了探针分子的选择性和特异性，报告基团则决定了识别的灵敏度，而连接体部分则可起到分子识别枢纽的作用。
七：荧光探针的基本信息
在紫外-可见-近红外区有特征荧光，并且其荧光性质（激发和发射波长、强度、寿命、偏振等）可随所处环境的性质，如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。与核酸(DNA或RNA)、蛋白质或其他大分子结构非共价相互作用而使一种或几种荧光性质发生改变的小分子物质。可用于研究大分子物质的性质和行为。fluorescence probe荧光共振能量传递 (FRET)
八：与其他分子生物学方法相比,用荧光探针RT-PCR法检测诺如病毒有什么优势?
方法包括等温核酸扩增（NASBA）、逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、荧光染料RT-PCR、荧光探针RT-PCR、多重RT-PCR等，是目前检测诺如病毒应用最广泛的方法，被称为检测诺如病毒的“金标准”。
NASBA直接扩增RNA来进行检测，仪器相对简便，通过琼脂糖凝胶电泳、印迹杂交或者荧光检测来鉴定结果，灵敏度低于RT-PCR；RT-PCR通过逆转录RNA模板、PCR扩增特异性产物，使用琼脂糖凝胶电泳来鉴定结果；荧光染料RT-PCR通过向RT-PCR反应体系中添加非特异性的荧光染料，可以在反应过程中监测扩增产物的生成量，但需要做熔解曲线分析来确定反应的特异性；荧光探针RT-PCR通过特异性的荧光探针与引物，可实时监控反应过程中特异性产物的变化，并且可以实现同一管中多个基因的检测（多重），特异性较好，假阳性率低，检测灵敏度可达10-100拷贝/反应，可用于取代普通RT-PCR。
九：生物芯片技术的荧光探针
目前用荧光探针作为检测信号的仪器，主要是考虑荧光标记所要检测的DNA的效率，以及荧光探针本身的发光效率和光谱特性。 1.末端标记：在引物上标记有荧光探针，在DNA扩增过程时，使新形成的DNA链末端带有荧光探针。2 .随机插入：选择四种缄机基，使其中一种或几种挂有荧光探针，在PCR过程中，带有荧光探针的碱基和不带荧光探针的碱基，同时参与DNA链的形成。由于带有荧光探针的碱基，可能影响PCR的产物，因此，需要调整荧光标记的碱基与未标记的碱基比率，以使得PCR产量和带有荧光探针的碱基在DNA的插入率达到一个平衡的水平，使杂交信号最强。 主要考虑以下几个因素：荧光探针的激发和发射频谱；荧光探针的发光效率；荧光探针对PCR或逆转录效率的影响；不同荧光探针的发射光谱是否有重叠。常用的荧光探针：FITC，CY-3，ALEAX488，CY-5，ALEAX564
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