一:取原代的上皮细胞,怎么把成纤维细胞除掉
原代培养 通过组织块直接长出单层细胞或用酶或机械方法将组织分散成单个细胞开始培养,在首次传代前的培养可认为是原代培养。原代培养最大的优点是,组织和细胞刚刚离体,生物性状尚未发生很大变化,在一定程度上能反映体内状态。特别是在细胞培养会合时,原代培养的某些特殊功能表达尤为强烈。在这样的培养阶段能更好地显示与亲体组织紧密结合的形态学特征。在供体来源充分、生物学条件稳定的情况下,采用原代培养做各种实验,如药物测试、细胞分化等,效果很好。但应注意,原代培养组织是由多种细胞成分组成的,比较复杂。即使全为同一类型的细胞,如上皮细胞或成纤维细胞,也仍具有异质性,在分析细胞生物学特性时比较困难。其次,由于供体的个体差异及其他一些原因,细胞群生长效果有时也不一致。
二:在细胞培养时怎么去除里边的成纤维细胞
最快的办法,用齐氏生物的FibrOutTM成纤维抑制剂,效果还是不错的!
成纤维细胞生长抑制试剂盒—FibrOut™ 是由多种生化复合物组成的混合物、抗体或特殊的试剂。它能够抑制成纤维细胞过度增长或污染从而有效地增加靶细胞的产量。每种成纤维细胞生长抑制试剂盒都可定制到特定组织和特定细胞,经验证可与对应的PrimaCellTM系统高效协同工作,可为您带来每一类原代细胞培养的最佳结果。每种成纤维细胞生长抑制试剂盒都配备了最合适的缓冲液。
FibrOut™ 是一种包含几种生化复合物和试剂的完整系统,它在原代细胞培养中能抑制成纤维细胞增殖,从而促进靶细胞生长。每种成纤维细胞生长抑制试剂盒都可定制到特定组织和特定细胞,经验证可与对应原代细胞培养试剂盒-PrimaCellTM高效协同工作,可为您带来每一类原代细胞培养的最好结果。每种成纤维细胞生长抑制试剂盒都配备了最合适的缓冲液。成分包括 (1)胰蛋白酶;(2)胶原酶;(3)D-缬氨酸;(4)顺式羟基脯氨酸;(5)硫柳汞;(6)苯巴比妥;(7)系列血清替代品;(8)抗中胚层带抗体。
参考文献:
1. Cancer Res. 2010 May 1;70(9):3537-46,Epub 2010 Apr 20. Requirement of the NF-kappaB subunit p65/RelA for K-Ras-induced lung tumorigenesis. Bassères DS, Ebbs A, Levantini E, Baldwin AS.
2. Nat Commun. 2013;4:1795. Recruitment of mesenchymal stem cells into prostate tumours promotes metastasis. Jung Y, Kim JK, Shiozawa Y, Wang J, Mishra A, Joseph J, Berry JE, McGee S, Lee E, Sun H, Wang J, Jin T, Zhang H, Dai J, Krebsbach PH, Keller ET, Pienta KJ, Taichman RS.
3. Mol Biol Cell. 2012 Jul;23(14):2755-69. Calcium-calmodulin kinase I cooperatively regulates nucleocytoplasmic shuttling of CCTα by accessing a nuclear export signal. Agassandian M, Chen BB, Pulijala R, Kaercher L, Glasser JR, Mallampalli RK.
三:成纤维细胞为什么可以进行传代培养
细胞由原培养瓶中经过稀释传到新培养瓶中的过程叫传代,普通的细胞都有寿命因此能传的代数也有所不同,如神经元细胞只能原代培养,胶质细胞可传5代左右,而恶性细胞系已经永生化即理论上来说如果不出现操作失误可以传无限多代,所以肯定可以传代培养啊
四:肺成纤维细胞为什么要和巨噬细胞一起进行原代共培养
应该是因为肺成纤维细胞比较容易产生细胞碎片或容易死亡,培养巨噬细胞是为了吞噬死亡细胞等,清理细胞生长环境
五:心肌细胞培养,成纤维细胞,原代培养,细胞建模,求助
[威斯腾]生物的原代细胞养的挺好的,上次找他们做过一次,感觉还可以
六:如何去除成纤维细胞
1. 消化法:必须用胶原酶消化;
2. 组织块法:用锐利刀剪,组织块不必剪得很小,米粒大小即可,放置在6孔板内,一孔内5-6个组织块,加入少量液体,以组织块不漂起为宜,第二、三天换等量液体。表皮不必去除,只要保证真皮面朝下即可,上皮细胞不可能在真皮细胞培养环境下生长。养过皮肤成纤维细胞和THP-1细胞。皮肤成纤维细胞是贴壁生长的。THP-1细胞是悬浮的。由于我们实验室养细胞的时间也不是很长,所以也只能说说自己平时的操作了。先说皮肤成纤维细胞。
七:鸡胚成纤维细胞到底可不可以传代
可以传代.而且传代后形态要比原代时更好一点.原代杂细胞稍微多点.
如果需要,有DF1,是CEF细胞系,但是不太好养,娇贵,都用10%的GIBCO血清养,而普通CEF用DMEM加国产血清就可以长很好.
只要你原代细胞形态好,可以传1代是绝对没有问题的.如果细胞好可以传2代,但不建议传太多次,因为细胞本身没有多大分裂增殖能力.
另外实验最好选在传细胞后24h内,这样细胞敏感性可能高一些.