正向引物和反向引物

一:正向引物与反向引物

一定要的。

正向引物:

5'....CTTCGAAATTC3'

反向引物:

5'....CCGATCGGGAGA3'

回答楼主的补充问题:

设计正向引物时,该引物序列应该具有和你待扩增DNA序列接近5‘段处的序列。反向引物设计,该引物序列应该具有的是和你待扩增DNA序列接近3’端处的序列的反向互补序列。楼上的没有理解,完全整反了。

二:测序时,为什么要有正向和反向之分

反向测序:就是用下游引物做测序引物往上测序。

正向测序:就是用上游引物做测序引物往下测序。

双向:就是正反两头同时测

测通:就是得到全场序列。一般超过1600bp的需要设计中间引物才可以测通。

三:PCR引物设计 正向引物为什么从5'

所有核酸都是从5‘开始记录和书写的。

不光是正向引物,反向引物也应该从5’开始书写

注意:从5'-3’是记录和书写核酸序列的,约定俗成的规矩,实际生物学反应不一定从5‘开始

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