一:正向引物与反向引物
一定要的。
正向引物:
5'....CTTCGAAATTC3'
反向引物:
5'....CCGATCGGGAGA3'
回答楼主的补充问题:
设计正向引物时,该引物序列应该具有和你待扩增DNA序列接近5‘段处的序列。反向引物设计,该引物序列应该具有的是和你待扩增DNA序列接近3’端处的序列的反向互补序列。楼上的没有理解,完全整反了。
二:测序时,为什么要有正向和反向之分
反向测序:就是用下游引物做测序引物往上测序。
正向测序:就是用上游引物做测序引物往下测序。
双向:就是正反两头同时测
测通:就是得到全场序列。一般超过1600bp的需要设计中间引物才可以测通。
三:PCR引物设计 正向引物为什么从5'
所有核酸都是从5‘开始记录和书写的。
不光是正向引物,反向引物也应该从5’开始书写
注意:从5'-3’是记录和书写核酸序列的,约定俗成的规矩,实际生物学反应不一定从5‘开始