色谱定量分析

一：色谱分析有几种定量方法

色谱分析常用的定量方法：归一化法、内标法和内加（增量）内标法、外标法。 　　1、面积归一化法优点是简便、准确，当操作条件变化时对结果影响较小，宜于分析多组分试样中各组分的含量。但是试样中所有组分必须全部出峰，因此，此法在使用中受到一定限制。 　　2、外标法是用纯物质配成一系列不同浓度的标准溶液（或直接购买不同浓度标准溶液）分别取一定体积，注入色谱仪，根据峰面积和浓度做标准曲线。在分析未知样时按与标准曲线相同的操作条件和方法，由标准曲线查出所需组分的浓度（现在在工作站上直接就能求出浓度）。此法要求进样准确，操作条件稳定，分析样品和标准曲线条件必须一致。 　　3、内标法是试样中所有组分不能全部出峰或只要求测定试样中某个或某几个组分时，可采用此法。内标法是在准确称取一定量的试样中，加入一定的标准物质（内标物），根据内标物和试样的质量以及色谱图上的相应峰面积，计算待测组分的含量。内标法的关键是选择合适的内标物，内标物应是试样中不存在的纯物质，物质与被测物质相近，能溶于样品中，但不能于样品发生反应。此法比较费事，一般不使用于快速分析。

二：怎样应用气相色谱仪进行定量分析

内容摘要：色谱定量分析的依据是被测物质的量与它在色谱图上的峰面积(或峰高)成正比。数据处理软件(工作站)可以给出包括峰高和峰面积在内的多种色谱数据。因为峰高比峰面积更容易受分析条件波动的影响，且峰高标准曲线的线性范围也较峰面积的窄，因此，通常采用峰面积进行定量分析。

色谱定量分析的依据是被测物质的量与它在色谱图上的峰面积(或峰高)成正比。数据处理软件(工作站)可以给出包括峰高和峰面积在内的多种色谱数据。因为峰高比峰面积更容易受分析条件波动的影响，且峰高标准曲线的线性范围也较峰面积的窄，因此，通常采用峰面积进行定量分析。

(1)校正因子定量

绝对校正因子(f)指单位峰面积(A)所对应的被测物质的浓度(C)，即　　f=C/A　　样品组分的峰面积与相同条件下该组分标准物质的校正因子相乘，即可得到被测组分的浓度。绝对校正因子受实验条件的影响，故定量分析时常采用相对校正因子。相对校正因子(f’)指某物质与选择的标准物质S的绝对校正因子之比。即

f=f'/fs

相对校正因子只与检测器类型有关，而与色谱条件无关。

(2)归一化法

采用归一化法进行定量分析的前提条件是样品中所有成分都要能从色谱柱上洗脱下来，并能被检测器检测。归一法主要在气相色谱中应用。

(3)外标法　　外标法包括直接比较法和标准曲线法。直接比较法是将未知样品中某一物质的峰面积与该物质的标准品的峰面积直接比较进行定量。通常要求标准品的浓度与被测组分浓度接近，以减小定量误差。

标准曲线法是将被测组分的标准物质配制成不同浓度的标准溶液，经色谱分析后制作一条标准曲线，即物质浓度与其峰面积(或峰高)的关系曲线。根据样品中待测组分的色谱峰面积(或峰高)，从标准曲线上查得相应的浓度。标准曲线的斜率与物质的性质和检测器的特性相关，相当于待测组分的校正因子。

(4)内标法　　内标法是将已知浓度的标准物质(内标物)加入到未知样品中去，然后比较内标物和被测组分的峰面积，从而确定被测组分的浓度。由于内标物和被测组分处在同一基体中，因此可以消除基体带来的干扰。而且当仪器参数和洗脱条件发生非人为的变化时，内标物和样品组分都会受到同样影响，这样消除了系统误差。当对样品的情况不了解、样品的基体很复杂或不需要测定样品中所有组分时，采用这种方法比较合适。

(5)标准加入法

标准加入法可以看作是内标法和外标法的结合。具体操作是取等量样品若干份，加入不同浓度的待测组分的标准溶液进行色谱分析，以加入的标准溶液的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制工作曲线。样品中待测组分的浓度即为工作曲线在横坐标延长线上的交点到坐标原点的距离。由于待测组分以及加入的标准溶液处在相同的样品基体中，因此，这种方法可以消除基体干扰。

但是，由于对每一个样品都要配制三个以上的、含样品溶液和标准溶液的混合溶液，因此，这种方法不适于大批样品的分析。

三：高效液相色谱是定性还是定量分析

色谱图横轴是保留时间，可以定性。就是说，已知在这个方法下，甲基萘是6.1min出峰。位置样品在6.1min处有色谱峰，那么这个样品中就含有甲基萘。

色谱图的纵轴市电信号，反应出来就是峰高或者是峰面积。而这个参数就是定量。比如甲基萘0.1mg/ml浓度的样品峰面积是100，现在未知样品在6.1min峰面积是1000，那么样品中甲基萘的浓度就是1.0mg/ml

四：高效液相色谱有几种定量方法？其中那种是比较精确的定量方法？并简述？

色谱定量分析是根据组分检测响应讯号的大小，定量确定试样中各个组分的相对含量。其依据是：每个组分的量(重量或体积)与色谱检测器产生的检测响应值(峰高或峰面积)成正比。具体到特定方法，主要有下列方法：

1.归一化法

当样品中所有组分能全部流出色谱柱，并在检测器上都能产生相应信号（得到色谱峰）时，常采用归一化法。

Ci = mi/m×100％ = fi•Ai /Σ fi•Ai ×100％

* 优点：简单方便， 不受进样量及操作条件波动的影响

* 缺点：所有组分都必须出峰， 每个组分都必须有校正因子

2.外标法（又称标准曲线法）

配制已知浓度的标准样品进行色谱分析，测量各组分的峰面积或峰高，作峰面积(或峰高)和浓度的标准曲线，然后在与标准样品分析相同操作条件下，进入相同量(一般为体积)的未知样品，测得被分析组分的峰面积（或峰高），在标准曲线上即可查得相应的浓度。

在工厂的日常控制分析中大多数采用这种方法，分析结果的准确性主要取决于进样量的重复性和操作条件的稳定性。

Ci = mi/m×100％ = fiAi/m×100％

* 校正：标准曲线、两点法、单点法

* 优点：简便、无需所有组分都出峰（校正因子），经常用于几个组分的分析

* 缺点：操作条件波动的影响较大,进样量影响大

3.内标法

由于吸附或化学反应等原因，色谱柱不能使所有的组分都流出来，或者各组分都能流出，但检测器不能对所有组分都给出相应的色谱峰，或者有的样品含量过大（得不到完整的峰），或者过小，或者只要求定量分析复杂样品中几个组分，均可采用内标法。

过程：在总量为m样品中如入质量为mS的内标物S，然后根据被测物和内标物的重量和在色谱图上相应的峰面积比求出某组分i,的含量

mi/ms = fiAi / fsAs

Ci = mi/m ×100％

= fiAi ms / fsAs m×100％

* 优点：不需所有组分都出峰（校正因子），操作条件和进样量基本无影响

* 缺点：内标物难找－－稳定无反应、结构性能，相似、保留时间内插并完全分离

* 注意：内标法比较适用于低含量组分的分析， 一般选作内标物的物质，最好在样品中不存在，其保留值在所有组分保留值的中间，加入内标物的含量和待测组分含量不应相差很大。

4.叠加法（内加法）

内加法适用于较特殊的情况：图谱上没有适当位置可插入内标峰，或因各种条件限制无合适的内标物时。

此时可先以样品出一张图，再在样品中加入一定量被测组分后再进样，看峰面积增加了多少，由此比例来求出原始含量。

五：气相色谱法哪些参数可以用来定性和定量分析

简单的说气相色谱的出峰时间又称保留时间用来定性，峰面积用来定量

六：色谱分析中常用的定量分析方法有哪几种？？？

色谱分析中常用的定量分析方法有哪几种？

面积归一化法、外标法、内标法、标准曲线法等