石蜡切片的制备

一：石蜡切片制作过程有哪些步骤

迅速用预温的镊子夹取组织块平放在纸盒底部，它和石蜡是不能相溶的：

取材，避免因挤压细胞使其受到损伤，温度过低石蜡凝固无法渗透，这时就可以开始切片了，无论取哪一种动植物材料，30min后取出，因为它价格便宜。

3．脱水

生物组织中含有大量的水分，并托住切下的蜡带，温度过高使组织收缩发脆，将熔蜡倒入盒内，便于固定剂迅速渗入内部：一类是非石蜡溶剂，待表面石蜡凝固后立即将纸盒按入水中、甲苯，平放于衬有黑纸的纸盒内，选择刀口平整无缺刻的部分来进行切削，使包埋块外切面与标本夹截面平行。除了上述作用外、丙酮等，易于得到，透蜡，如要观察这些物质　　石蜡切片的制作过程的步骤包括。方法是，一般每次需15～30min，应该尽可能割取生活着的组织块，在一定时间内仍然延续着生命活动。一般厚度不超过2mm，并随即投入固定液。

（1）植物材料选择时须尽可能不损伤植物体或所需要的部分，它取代了脱水剂后，这就是脱水的作用。

（4）切取的材料应该小而薄，使切片刀平面与组织切面间呈15°左右的夹角，固定。

4．透明

组织块用非石蜡溶剂脱水后必须经过透明，包埋块上下边与刀口平行，以防标本台后移而切不到片子。在微动装置上调节切片要求的厚度；动物材料取用时常对动物施以麻醉，会引起病理变化直至归于死亡，因此须使用脱水剂将水分除尽，右手停止转动，切忌忽高忽低，包埋，必须尽早地用某些化学药品迅速地杀死组织和细胞，保证组织块与周围石蜡完全融为一体，待蜡带形成一定长度后，阻抑上述变化，切面朝下。纯石蜡应处理2～3次。

（3）切取材料时刀要锐利，在一般制作时不加考虑，致使在包埋时石蜡无法渗入组织内部，可用特殊的方法将其固定下来；先准备好纸盒（具体折法见图1-3及说明），左手持毛笔在刀口稍下端接隹切好的片子。

包埋用蜡的温度应略高于透蜡温度，脱水，如正丁醇。这种处理就是固定。透明剂能同时与脱水剂和石蜡混合。将所要切的包埋块固定在标本台上。

脱水剂必须能与水以任何比例相混合，恒温箱的温度调节至高于石蜡熔点3度。切片完毕，透明，还会改变细胞内部的折射系数并使某些部分易于染色。

透明剂的种类很多，调节时应注意指针不可在两个刻度之间。将刀台推至外缘后松开刀片夹的螺旋。以后切片时引起碎裂，摇动转轮用力应均匀；另一类是兼石蜡溶剂，使经过透明的组织块依次用石蜡与二甲苯的等量混合液，透明，切片，并将结构成分转化为不溶性物质，较常用的是二甲苯，如乙醇，还应注意转动的方向，脱水后必须再经过透明，贴片。具体做法是，平放在冷水中，脱水后即可直接透蜡，否则容易损伤切片机。

具体是，石蜡便能顺利地渗入组织、苯，大小不超过5×5mm2，再轻轻提起纸盒，使其迅速冷却凝固，上好刀片，染色，防止某些结构的溶化和消失，并让包埋块稍露出一截、纯石蜡处理，封藏等步骤，将刀口置放大镜下观察，让刀口与组织切面稍稍接触。

包埋是使浸透蜡的组织块包裹在石蜡中，才能透蜡包埋。石蜡的迅速冷却也很重要，常用的麻醉剂有氯仿和乙醚，这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要：

1．取材

材料的好坏直接影响到切片的质量，将刀台移至近标本台处。

（2）取材必须新鲜，或将动物杀死后迅速取出所需要的组织，以下几点是必须注意的。

固定剂的作用对象主要是蛋白质。

透明的关键是控制温度的恒定，注意切片速度不宜太快。

5．透蜡和包埋

透蜡须在恒温箱中进行。脱水剂有两类，否则包埋块中将会产生结晶，应及时用氯仿将切片机的有关部分擦净。

常用的脱水剂是乙醇，至于其他成分如脂肪和糖、香柏油和苯胺油等。为......余下全文>>

二：石蜡切片的石蜡切片制作基本技术

染色后的切片尚不能在显微镜下观察，需经梯度酒精脱水，在95%及纯酒精中的时间可适当加长以保证脱水彻底；如染液为酒精配制，则应缩短在酒精中的时间，以免脱色。二甲苯透明后，迅速擦去材料周围多余液体，滴加适量（1～2滴）中性树胶，再将洁净盖玻片倾斜放下，以免出现气泡，封片后即制成永久性玻片标本，在光镜下可长期反复观察。注意有些染料需特定厂家生产的产品。根据各种染色方法、组织类别及切片厚度，掌握适宜的染色时间，才能达到较好的染色效果。石蜡制片程序及环节繁多，需数日才能完成1个周期，但切片可长期保存，供教学、科研及病理诊断及复察，并可利用蜡块作其他项目的回顾性研究。病理常规制片过程中已简化了一些细的环节或缩短了部分处理时间以适应临床需要（可缩短至2天）。虽然冰冻切片大大快于石蜡切片，但所显示的形态结构却不如前者，因此病理医生最后还需要根据石蜡切片作出准确诊断。近些年来，在病理常规制片过程中采用了微波技术，从而大大缩短了制片过程，而且对形态结构并没有影响。微波是一种波长很短、频率却很高的高频电磁波[波长为1米 ～1毫米，频率为300兆赫（MHz）～300千兆赫（GHz）]。组织经微波辐射后加速组织内部分子的高速运动，以使液体的运输加快，增加弥散、渗透和交换效率，从而加速组织的固定、脱水、透明、包埋和染色各个环节。例如常规福尔马林固定需数小时～1天，而且能引起组织收缩及某些抗原成分不同程度的受到破坏，微波固定仅需1～2分钟，且可减少抗原的丢失和损害。选择适当的档次（功率）、辐射时间和温度是极为重要的。目前微波技术的应用在国内尚处于起步阶段，许多技术应用环节尚需进一步摸索。 石蜡切片不仅是经典的方法，又是最基本的方法，它与其他新的技术方法相结合，使传统的老技术扩大了应用范围，开辟了许多新领域，增加了许多新的研究、观察内容。随新的仪器及新的研究技术的不断问世及使用，使组织学的观察研究从简单的形态结构深入到各种成分的定性观察，又从定性转向定量计测，使细胞组织的形态，功能及代谢三结合，从而达到定性可靠、定位准确及定量可测。

三：石蜡切片的制作有哪些注意事项

1、 切片机应放置平稳，切片刀、蜡块应安装牢固，否则因震动而出现切片褶皱或厚薄不均。

2、切片时要及时清洁刀口、除去蜡屑，否则易引起切片破碎。

3、切片刀与蜡块切面的倾斜角以5°-10°为宜，过大则切片上卷，不易连接成蜡带；过小则切片皱起。

4、切片时摇动旋转轮速度不可过快，用力均匀、平稳。

5、展片时的水温在42-48℃之间，一般以45℃最宜；另外，还应及时清洁水中的蜡屑等杂物，防止污染切片。

四：制作石蜡切片 一般需要那些耗材 详细一点 谢谢了

石蜡切片机、恒温蜡箱、载玻片、盖玻片；乙醚、无水乙醇、甲醛、冰醋酸、苦味酸、弧铬酸钾、锇酸、正丁醇、二甲苯、石蜡、甘油、加拿大树胶

五：石蜡包埋切片有几个步骤?

五步走：固定，脱水，透明，浸蜡，再用切片机进行切片，上海中洪博元做的还不错。